基于抗体修饰ZnSe纳米晶检测肝癌标志物GPC3的试剂盒

摘要

本发明涉及一种基于抗体修饰ZnSe纳米晶检测肝癌标志物GPC3的试剂盒，主要包括：表面交联修饰GPC3抗体的ZnSe纳米晶，锌离子荧光探针溶液，GPC3抗体和GPC3蛋白标准品。本发明将双抗夹心免疫分析法和ZnSe纳米晶的阳离子交换反应相结合，实现对免疫反应中GPC3检测信号的放大，用于检测肝癌标志物GPC3具有信号稳定、灵敏度高和检测限低等优点，可应用于肝癌患者的早期诊断。

主权项

一种基于抗体修饰ZnSe纳米晶检测肝癌标志物GPC3的试剂盒，主要包括：表面交联修饰GPC3抗体的ZnSe纳米晶，锌离子荧光探针溶液，GPC3抗体和GPC3蛋白标准品，所述表面交联修饰的GPC3抗体为鼠抗人GPC3单克隆抗体、识别位点为重构GPC3蛋白的第303～460个氨基酸，GPC3抗体为鼠抗人GPC3单克隆抗体、识别位点为重构GPC3蛋白的第121～220个氨基酸，所述GPC3蛋白标准品为人重组GPC3蛋白；所述表面交联修饰GPC3抗体的ZnSe纳米晶由如下方法制备得到：取ZnSe纳米晶粉末加入磷酸缓冲溶液中，并相继加入足量的EDC和NHS，活化15～30分钟，过量的EDC用巯基乙醇进行淬灭，之后加GPC3抗体于37℃涡旋交联3～6小时，GPC3抗体与ZnSe纳米晶质量之比为1﹕1，交联过后经离心过滤纯化，即得所述表面交联修饰GPC3抗体的ZnSe纳米晶；所述锌离子荧光探针溶液组成如下：FluoZin‑3 3μM，AgNO₃ 500μM，溶剂为10mM、pH7.3的HEPES缓冲液。