使用酶工程法生产辅酶Q10的方法

摘要

本发明是有关于一种使用酶工程法生产辅酶Q10的方法，以辅酶Q0和十聚异戊二烯为原料、或者以辅酶Q1和茄尼醇为原料，其中，辅酶Q0、辅酶Q1、十聚异戊二烯进行磷酸化，茄尼醇进行溴化；在聚合酶的作用下，在40℃～60℃条件下，于反应器中进行辅酶Q10的合成反应，依次进行萃取，浓缩，结晶，干燥，得到成品。其中所述的聚合酶是通过以下步骤得到的：选择含有辅酶Q10的红假单胞光合菌，进行培养；破碎菌体细胞，用3％的盐水沉淀；分离沉淀物得到聚合酶。本发明的具有专一性，提高了反应效率，提高了产品质量。酶工程法生产的辅酶Q10，其侧链中不存在顺式结构的异戊二烯，产品的生物活性与微生物发酵法生产的产品相同，而生产成本大大降低。

主权项

1、一种使用酶工程法生产辅酶Q10的方法，其是在聚合酶的作用下，以辅酶Q0和十聚异戊二烯为原料、或者以辅酶Q1和茄尼醇为原料合成辅酶Q10，其特征在于其包括以下步骤：1)将辅酶Q0或辅酶Q1进行磷酸化；2)将十聚异戊二烯磷酸化或茄尼醇进行溴化；3)制备聚合酶，所述聚合酶是通过以下步骤得到的：选择含有辅酶Q10的红假单胞光合菌，进行培养；破碎菌体细胞，用3％的盐水静置，取上清，加入硫酸铵溶液，水浴加热，离心；弃上清并加入硫酸缓冲液透析；加入100mL 琼脂糖凝胶4B搅拌，用磷酸缓冲液分三次清洗；加氢氧化钠溶液调pH值后解离，过滤后的液体冻干，得聚合酶；4)在40℃～60℃的条件下，按照各合成物质的分子量的比例加入反应器皿中，并按照最后合成物重量的0.01％加入制备的聚合酶，搅拌10-30分钟；5)加入正己烷搅拌萃取；6)取正己烷层浓缩结晶；7)结晶物冷冻干燥得成品。