固定化角质酶、制备方法及其在去除水体中邻苯二甲酸酯类的应用

摘要

本发明涉及酶的固定化领域，具体涉及一种固定化角质酶、制备方法及其在去除水体中邻苯二甲酸酯类的应用，所述固定化角质酶以多孔金纳米材料为载体，角质酶通过物理吸附作用固定于多孔金纳米材料上，所述多孔金纳米材料的角质酶吸附量为30mg/g以上，所述多孔金纳米材料的孔径为40～50nm，制备方法为，将多孔金纳米材料加入角质酶溶液中，在45～55℃下振荡吸附，再经过洗涤、冷冻和真空干燥后，得到固定化角质酶，本发明可用于降解水体中的邻苯二甲酸酯类，本发明的固定化角质酶生物相容性好，吸附量大，吸附稳定性好。

主权项

一种固定化角质酶的制备方法，其特征是，包括以下步骤：（1）将金银合金置于丙醇中超声清洗，再用超纯水超声洗涤，于700～800℃条件下退火，退火时间为8～10h；（2）将上述预处理后的金银合金制成合金切片；（3）将上述合金切片置于质量分数为65～70%的硝酸溶液中腐蚀，腐蚀温度为25～30℃，时间为800～1000min，然后于200～250℃下退火，制得多孔金纳米材料；（4）将上述多孔金纳米材料加入角质酶溶液中，在45～55℃下振荡吸附，再经过洗涤、冷冻和真空干燥后，得到固定化角质酶；所述角质酶溶液是由角质酶与磷酸缓冲液或Tris‑HCl缓冲液配制而成，所述多孔金纳米材料与所述角质酶的质量配比为1:0.4～0.6，所述角质酶溶液中角质酶的浓度为0.2～1.0mg/mL，pH值为7.0～9.0；所述固定化角质酶以多孔金纳米材料为载体，角质酶通过物理吸附作用固定于多孔金纳米材料上，所述多孔金纳米材料的角质酶吸附量为30mg/g以上，所述多孔金纳米材料的孔径为40～50nm。