一种山竹快繁培养方法

摘要

本发明涉及植物组织培养技术，公开了一种山竹快繁培养方法，包括以下步骤：(1)外植体表面灭菌；(2)不定胚的诱导阶段；(3)外植体增殖阶段；(4)再生芽诱导生根。应用本发明所述的山竹快繁培养方法繁育山竹种苗，增殖系数可达5.4左右，所得试管苗保留了母本植株的优良特性，不会产生性状分离现象，种苗生长状况良好。1粒种子经1年培养可产生1500株左右山竹种苗，达到快速、大量繁育山竹种苗的目的，对山竹种植产业具有重大的实际意义。

主权项

一种山竹快繁培养方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)外植体表面灭菌从成熟山竹果实中获取的山竹种子，用加有洗衣粉或洗洁精的水溶液洗涤或流水冲洗2‑5h；再用酒精浸蘸5‑30s，边浸蘸边摇动山竹种子，无菌水冲洗；最后在含有次氯酸钠和吐温80的消毒液中浸泡15‑20min，边浸泡边摇动山竹种子，无菌水冲洗，备用；(2)不定胚诱导阶段经过步骤(1)处理过的山竹种子切块，转入添加质量浓度为0.3‑0.8mg/L的NAA和0‑5mg/L的BA的MS培养基或者添加质量浓度为2.0‑4.0mg/L的2,4‑D和0‑5mg/L的BA的MS培养基中，光照时间8‑12h/d诱导不定胚；(3)增殖阶段将步骤（2）获得的不定胚转入添加质量浓度2‑6mg/L的BA、10‑30g/L的蔗糖和2‑3g/L的Phytagel的WPM培养基诱导不定芽；待不定芽长出叶片，培养后取叶片横切3‑5mm，在MS培养基培养40‑60d产生芽点；芽点生长成再生芽时从叶片切除转入增殖培养基进行增殖培养；增殖培养基为添加质量浓度为0.9‑1.3mg/L的BA的WPM培养基；(4)再生芽诱导生根当再生芽长到13‑17mm时，转入生根培养基诱导生根，培养后移到苗圃进行假植；所述生根培养基为添加质量浓度为0.1‑1.0mg/L的IBA的1/2MS培养基。