酶解杜仲叶制备杜仲保健药粉的方法

摘要

本发明公开了酶解杜仲叶制备杜仲保健药粉的方法，该方法包括以下步骤：(1)制备杜仲叶基料；(2)用角质酶去除杜仲叶碎片表面的角质层；(3)用蛋白酶去除蛋白质组分；(4)用果胶酶酶解与角质层黏连的果胶质和部分植物细胞壁；⑸用纤维素酶继续酶解与角质层黏连的果胶质和部分植物细胞，细胞壁的水解有利于胞内药物成分的溶出；⑹杜仲保健药粉的制备。本发明用角质酶先去除杜仲叶表面的角质层，代替了传统的粉碎碾压处理，有利于完整的保护杜仲叶中的有效成分，且不会破坏杜仲胶的结构，在提取天然物质的同时还可以对剩余物进行杜仲胶的提取，一举两得，高效环保。适用于杜仲叶、杜仲树皮和杜仲果皮的加工利用。

主权项

酶解杜仲叶制备杜仲保健药粉的方法，其特征在于包括：(1) 制备杜仲叶基料取经过筛选的杜仲叶用风淋风选吹除杂质异物，经过揉烂或碾压折断且保持原大片结构，分装至3只1000ml三角瓶中或送入酶解罐中；(2) 用角质酶去除杜仲叶碎片表面的角质层分别在每只三角瓶中添加角质酶液，没过杜仲叶碎片，置水浴摇床中反应；反应后收集酶解液，用快速滤纸过滤，收集清液，并取样测紫外和色谱；将过滤得到的角质酶酶解液置于旋转蒸发仪中真空浓缩，添加无水乙醇至终浓度为75%～80%；添加乙醇后酶解液会出现部分沉淀，取上清液负载至环糊精上，沉淀另行收集；(3) 用蛋白酶（可选用酸性蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶）去除蛋白质组分及破坏织物组织结构称取蛋白质酶4.5g于500mL烧杯中，用食用级柠檬酸和柠檬酸钠配成pH缓冲液，分3次溶解酶制剂上的蛋白酶，收集上层清液，混合后，平均加注于三角瓶中；在最适pH条件下在摇床上酶解反应，反应后收集3瓶的酶解液，合并酶解液，过滤，取样测紫外和色谱；接着将酶解液滤液置于旋转蒸发仪中真空浓缩，添加无水乙醇至终浓度为75%～80%；添加乙醇后酶解液会出现部分沉淀，取上清液负载至环糊精上，沉淀另行收集；(4) 用果胶酶酶解与角质层黏连的果胶质和部分植物细胞壁 之后，称取果胶酶于500mL烧杯中，用食品级柠檬酸和柠檬酸钠调节pH为4.5，分3次溶解酶制剂上的果胶酶，收集上层清液，混合后，平均加注于三角瓶中；在最适pH条件下在摇床上酶解反应，反应后收集3瓶的酶解液，合并酶解液，过滤，取样测紫外和色谱；接着将酶解液滤液置于旋转蒸发仪中真空浓缩，添加无水乙醇至终浓度为75%～80%；添加乙醇后酶解液会出现部分沉淀，取上清液负载至环糊精上，沉淀另行收集； ⑸ 用纤维素酶继续酶解植物细胞组织的细胞壁，细胞壁的水解有利于胞内药物成分的溶出称取柠檬酸和柠檬酸钠，溶于1500mL水中，至pH≈5.0，备用；取纤维素酶于500mL烧杯中，用备用的柠檬酸‑钠溶液分三次溶解酶制剂上的纤维素酶蛋白，收集上层清液，混合后，平均加注于三角瓶中；在最适pH条件下在摇床上酶解反应，反应后收集3瓶的酶解液，合并酶解液，过滤，取样测紫外和色谱；接着将酶解液滤液置于旋转蒸发仪中真空浓缩，添加无水乙醇至终浓度为75%～80%；添加乙醇后酶解液会出现部分沉淀，取上清液负载至环糊精上，沉淀另行收集；⑹ 杜仲保健药粉的制备称取50gβ‑环糊精于旋转蒸发瓶中，将经乙醇处理的各种酶的酶解液上层清液逐量添加到盛有β‑环糊精的蒸发瓶中，在旋转蒸发仪上蒸干，经粉碎机粉碎，最终制得杜仲保健药粉；经乙醇处理的角质酶酶解液、蛋白酶酶解液、果胶酶酶解液、纤维素酶酶解液以此相同方法进行处理，制得杜仲保健药粉。