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<p>Es wird ein hochsensitives Verfahren zur Identifikation und/oder Sequenzierung einer unbekannten DNA- oder RNA-Sequenz beschrieben, die an eine bekannte DNA- oder RNA-Region angrenzt, bei dem man (a) in einer ersten Stufe ein oder mehrere DNA- oder RNA-Fragmente einer oder mehrerer linearen PCR-Stufen unter Verwendung eines oder mehrerer Primer unterzieht (b) die erhaltenen Einzelstränge zu Doppelsträngen auffüllt (c) die Doppelstränge mit einem oder mehreren Restriktionsenzymen schneidet, um glatte und/oder kohäsive Enden zu erzeugen (d) an die geschnittenen Enden ein Oligonukleotid bekannter Sequenz anfügt und (e) die erhaltenen DNA-Fragmente vermehrt und nachweist.</p> |
