高水平表达蛋白质的宿主细胞的选择

摘要

本发明提供了一种DNA分子，其包含编码如下的多顺反子转录单位：i)感兴趣多肽，和ii)在真核宿主细胞中具有功能的选择标记多肽，其中感兴趣多肽具有与选择标记多肽的翻译起始序列相独立的翻译起始序列，且其中感兴趣多肽的编码序列在所述多顺反子转录单位中位于选择标记多肽的编码序列的上游，且其中内部核糖体进入位点(IRES)位于感兴趣多肽的编码序列的下游和选择标记多肽的编码序列的上游，且其中编码链中编码选择标记多肽的核酸序列包含GTG或TTG起始密码子。本发明也提供了获得表达感兴趣多肽的宿主细胞的方法，所述宿主细胞包含本发明的DNA分子。本发明进一步提供了感兴趣多肽的生产，包括培养包含本发明的DNA分子的宿主细胞。

主权项

1. DNA分子，其包含：包含编码i)感兴趣多肽，和ii)在真核宿主细胞中具有功能的选择标记多肽，的至少一个编码序列的多顺反子转录单位其中所述感兴趣多肽具有与选择标记多肽的翻译起始序列相独立的翻译起始序列，其中感兴趣多肽的至少一个编码序列在所述多顺反子转录单位中位于选择标记多肽的至少一个编码序列的上游，其中内部核糖体进入位点(IRES)位于感兴趣多肽的至少一个编码序列的下游和选择标记多肽的至少一个编码序列的上游，并且特征在于编码选择标记多肽的编码序列包含选自如下一组的翻译起始序列：a)GTG起始密码子；b)TTG起始密码子；c)CTG起始密码子；d)ATT起始密码子；及e)ACG起始密码子。