雪莲体胚诱导发生的方法

摘要

本发明涉及一种雪莲体胚诱导发生的方法，该方法是将雪莲种子进行愈伤组织的诱导，体胚的诱导发生得到雪莲的体胚。根据植物叶片再生原理，以幼苗子叶为外植体，经固体和液体悬浮培养诱导形成雪莲体胚，为人工种子的制作奠定基础。

主权项

1、一种雪莲体胚诱导发生的方法，其特征在于按下列步骤进行：a、选择雪莲种子，先用75％酒精表面灭菌20-30秒，再用0.1％升汞溶液浸泡3-5min，然后用无菌水冲洗3次，放入无菌培养皿或MS培养基上，8-15天萌发；b、取刚萌发幼苗的叶为外植体，切割成大小0.5-1cm2，将其接入琼脂固化MS+2，4-D0.05-2.0mg/L+BA0.5-3.0mg/L的愈伤诱导培养基上，固体培养条件为：日光灯2500-3500lx，光照12h/d，温度为25±1℃，湿度为65±5％，20-25天后，得到愈伤组织；c、再与愈伤诱导培养基相同的培养基上继代培养一次，然后挑选新鲜、松散、浅黄色的愈伤，以30g/L的接种量接入液体培养基MS+2，4-D0.05-2.0mg/L的三角瓶中，在25±1℃，2500-3500lx，120转/min的条件下培养15-25天，在液体培养的第12-14天，出现球状颗粒，在液体培养的第20天后其中的愈伤表面完全被球状突起包埋，在液体培养的第25天后表面突起不同程度的萌发，形成白色的茎段。