一种从含有无活性蛋白的溶液中回收生物活性形式重组蛋白的方法

摘要

本发明涉及一种从含有无活性蛋白的溶液中制取天然生物活性形式重组蛋白的方法，无活性蛋白以不溶性包涵体或氧化的、错误折叠的和聚集的无用蛋白形式存在，该方法包括用第一碱性缓冲液稀释无活性蛋白溶液，加入SDS和L-半胱氨酸以同时溶解和还原该蛋白，相对第二碱性缓冲液进行透滤使SDS和L-半胱氨酸的浓度下降约70％—90％，氧化已变性和还原的蛋白以形成与天然存在的生物活性蛋白一致的二硫键。

主权项

1、一种从含有无生物活性蛋白的溶液中制取天然生物活性形式重组蛋白的方法，该方法包括下列步骤：a)用第一碱性缓冲液稀释无活性蛋白溶液；b)用足量的变性剂SDS和还原剂L-半胱氨酸处理稀释后的蛋白，以同时溶解和还原所说的蛋白；c)通过相对于第二碱性缓冲液进行透滤，使所得到的溶液中SDS和L-半胱氨酸的浓度下降约70%至约90%；d)氧化(c)步骤的已变性和还原的蛋白，以形成与天然存在的生物活性蛋白一致的二硫键。