EXPRESION Y PURIFICACION DE FACTOR TISULAR SOLUBLE RECOMBINANTE.

摘要

SE DESCUBRE UN METODO PARA FABRICAR CUALQUIER PROTEINA DE FORMA QUE SE PUEDA AISLAR RAPIDAMENTE DE UNA SOLUCION USANDO UN ANTICUERPO MONOCLONAL ESPECIFICO LLAMADO "HPC-4". AHORA SE HA DETERMINADO QUE ES POSIBLE FORMAR UNA PROTEINA DE FUSION DEL EPITOPE CON UNA PROTEINA A AISLAR, Y AISLAR LA PROTEINA USANDO CROMATOGRAFIA DE AFINIDAD BASADA EN EL HPC-4. DE FORMA PREFERENTE SE INSERTA UN LUGAR DE DISOCIACION DE LA PROTEASA ESPECIFICA ENTRE EL EPITOPE Y LA PROTEINA DE FORMA QUE EL EPITOPE SE PUEDA SEPARAR DE LA PROTEINA AISLADA. COMO EJEMPLO, UN FACTOR TISULAR SOLUBLE FUNCIONALMENTE ACTIVO SE PUEDE EXPRESAR A PARTIR DE UN VECTOR INSERTADO EN UN SISTEMA DE EXPRESION PROCARIOTICA. EL FACTOR TISULAR RECOMBINADO SE PUEDE AISLAR RAPIDAMENTE EN UN SIMPLE PASO CROMATOGRAFICO USANDO EL ANTICUERPO MONOCLONAL HPC-4 INMOVILIZADO EN UN SUBSTRATO ADECUADO. UNA VEZ AISLADO, EL EPITOPE DE PROTEINA C ES ELIMINADO POR DIVISION CON EL FACTOR XA, LIBERANDO EL FACTOR TISULAR SOLUBLE FUNCIONALMENTE ACTIVO.