一种诺如病毒拉曼探针标记的免疫层析检测方法

摘要

本发明涉及一种诺如病毒拉曼探针标记的免疫层析检测方法。本发明的检测方法原理是以硝酸纤维素膜(Nitrocellulose membrane,NC)为SERS基底，拉曼标记免疫探针标记、并基于胶体金免疫层析法(Immunochromatographic Assay，ICA)构建了新型的表面增强拉曼光谱免疫层析技术(SERS‑ICA)，并运用该方法对检测了诺如病毒进行检测。检测分为样本固定、胶体金渗透、抗原抗体反应、检测等过程，检测结果在检测仪器上通过软件在1074cm^‑1波段时读取峰值，有峰值则为阳性，无峰值则为阴性。本发明能对诺如病毒进行快速灵敏的检测，操作简便，通过本发明可大幅度提高出入境口岸一线检验检疫人员的检测效率，对防控诺如病毒引起的腹泻具有重要意义。

主权项

一种诺如病毒拉曼探针标记的免疫层析检测方法其特征在于：包括以下检测步骤：(1)拉曼标记免疫胶体金‑抗体复合物的制备，拉曼标记免疫胶体金‑抗体复合物包括胶体金、诺如病毒VP1蛋白抗体、探针分子；(2)样本制备；(3)胶体金试纸条制备：先将拉曼标记免疫胶体金‑抗体复合物喷涂到胶体金垫，再将样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜和吸水纸依次组装在聚乙烯PVC底板上，切割成6X2cm规格后，成为一根免疫胶体金层析试纸条；(4)用划膜仪将制备好的样本划到胶体金试纸条T线处；(5)胶体金层析：在胶体金试纸条的加样孔滴加缓冲液，静置15min；(6)检测结果读取：使用拉曼光谱仪在测卡T线位置检测SERS信号，并根据检测信号判断结果。