棉铃虫蜕皮调节转录因子cDNA及其克隆方法与重组应用

摘要

棉铃虫蜕皮调节转录因子cDNA及其克隆方法与重组应用，属于生物基因工程技术领域。棉铃虫蜕皮调节转录因子具有SEQ ID NO 1和SEQ ID NO.2所示的序列。本发明的克隆方法是，从棉铃虫中提取总RNA或mRNA，反转录合成cDNA；根据蜕皮调节转录因子的保守序列设计引物，通过链式聚合酶反应扩增到一个DNA片段；将扩增产物纯化，取纯化产物克隆到pGEM-T Easy载体，转化DH5α细胞，平板过夜培养。本发明棉铃虫蜕皮调节转录因子，通过基因重组技术在昆虫核型多角体病毒中进行表达，获得有杀虫活性的基因重组病毒，用于害虫防治；或者通过基因工程方法将棉铃虫蜕皮调节转录因子专入作物，获得具有抗虫能力的作物。

主权项

1.棉铃虫蜕皮调节转录因子cDNA，其特征在于，具有如下序列：(1)SEQ ID NO 1的信息(a)序列特征： *长度：1668碱基对 *类型：核酸 *链型：双链 *拓扑结构：线性(b)分子类型：cDNA(c)假设：否(d)反义：否(e)最初来源：棉铃虫(Helicoverpa armigera)(f)序列描述：SEQ ID NO.1atgaacaaca accagttcca cgatttattt gggtcccagt ggcctccgga ccagcacgga 60ggtcactcgt cggcatcgac gatgctgcac cagtcccagg gcctgcccca gggtatgcag 120ctgaagagag aacctcatac ggatgtgcag ccggtgatgc acaaccagat gggcacggac 180atcacgtcag ggtccgtggc ggacagcaca tcccccccgc ctggcagcag tgacgggatg 240ttcggctcgt ctatatctgg catgtttatg gataagaaag ccgctaattc tataagagct 300caaatcgaaa taataccatg caaggtgtgt ggggataaat catctggagt ccactatggc 360gtcatcacct gcgaggggtg caagggtttc ttcaggcgat cacagagtac agtggtgaac 420taccagtgtc cacggaataa agcctgcgtg gtcgaccggg tcaacagaaa tcgttgtcag 480tattgcagat tgcagaaatg cctcaaactt ggaatgagcc gtgatgcggt gaagtttgga 540cggatgtcga aaaagcaacg tgagaaggtg gaagatgagg tgagattcca tcgcgcacag 600atgagagctc agactgacac ggcgcccgac tcagtatacg acgctcaaca acaaacgccg 660agctcaagcg accagttcca tggtcactac aatggctacc cgggctacgg gtcgccgttg 720tcctcatatg ggtacaacaa cgcagggccg gcgctacagt ccaacatggg aggcatacag 780cctcaagcac ctcaacagca gccctatgac gtgtcggctg attacgtgga ctccaccacg 840gcttacgagc cgaaacagac cgagggattc ttggatcctg attttattag tcatgcggag 900ggtgacatca gcaaagtcct ggtgaagagt ttggcagaag cacacgcaaa taccaacccc 960aaactggagt tcattcatga gatgttcaga aagccacagg atgtctccaa gcttctatac 1020tatagttcaa tgacgtacga ggaaatgtgg ctggattgtg cagacaaatt aactgggatg 1080attcagaata ttatcgagtt cgctaaactt atacccgggt tcatgaaact gactcaggat 1140gatcagattt tgctcttgaa atctggctcg ttcgagctcg ccatagtccg gctgtcgcga 1200ctgatagacg tcaaccgtga ccaagtgcta tacggtgatg cggtgctgtc catcagagaa 1260tgtgtgcatg cacgtgaccc ccgcgacgtg gcgctggtgg ttggtatctt cgacgcggca 1320aagacgatcg ctcgactcaa actcactgag actgaactgg cgctatacca gagccttgtg 1380ctattgtggc cagagcggca cggcgtccgc ggcaaccctg agatccagtg cctgttcaac 1440atgtcgatgg cggcgatgcg gcacgagatc gagaccaacc acgcccccct caagggagac 1500gtcactgttc tggacacgct gctcgccaag atacccacct tcagagaact atcactgatg 1560cacctggaag ctttgtgccg cttcaaggcc gcccaccccc accacgtatt cccggccctc 1620tacaaggagc tgttctcact cgacagcgtc ctggactaca cccacggt 1668。