| 主权项 |
1.一种可供细胞生长之人造薄膜的制造方法,包括: 提供一几丁质聚醣膜(Chitosan Membrance)与一半乳糖 结合蛋白(Galectin),其中该几丁质聚醣膜是藉由去 乙烯化几丁质而取得;以及 利用浸泡方式使该半乳糖结合蛋白直接披覆( Coating)于该几丁质聚醣膜上。 2.如申请专利范围第1项所述之可供细胞生长之人 造薄膜的制造方法,其中该半乳糖结合蛋白系选自 第一型半乳糖结合蛋白至第十四型半乳糖结合蛋 白所组成之族群。 3.如申请专利范围第1项所述之可供细胞生长之人 造薄膜的制造方法,其中该人造薄膜系提供3T3纤维 细胞及软骨细胞生长。 4.如申请专利范围第1项所述之可供细胞生长之人 造薄膜的制造方法,其中将该半乳糖结合蛋白披覆 于该几丁质聚醣膜上的方法包括: 将该半乳糖结合蛋白溶解于一缓冲液中,以形成一 半乳糖结合蛋白溶液;以及 将该几丁质聚醣膜浸泡于该半乳糖结合蛋白溶液 中,以使该半乳糖结合蛋白披覆于该几丁质聚醣膜 上。 5.如申请专利范围第4项所述之可供细胞生长之人 造薄膜的制造方法,其中该缓冲液包括一含盐之磷 酸缓冲液(Phosphate Buffer Saline,PBS)。 6.如申请专利范围第1项所述之可供细胞生长之人 造薄膜的制造方法,其中该人造薄膜系适用于皮肤 伤口之癒合。 7.如申请专利范围第1项所述之可供细胞生长之人 造薄膜的制造方法,其中该人造薄膜系适用于软骨 组织之重建。 8.如申请专利范围第7项所述之可供细胞生长之人 造薄膜的制造方法,其中该几丁质聚醣膜系披覆于 一软骨支架上。 9.如申请专利范围第8项所述之可供细胞生长之人 造薄膜的制造方法,其中将该几丁质聚醣膜披覆于 该软骨支架上的方法包括将该软骨支架浸泡于一 几丁质聚醣溶液中。 10.如申请专利范围第9项所述之可供细胞生长之人 造薄膜的制造方法,其中将该半乳糖结合蛋白披覆 于该几丁质聚醣膜上的方法包括: 将该半乳糖结合蛋白溶解于一缓冲液,以形成一半 乳糖结合蛋白溶液;以及 将该软骨支架浸泡于该半乳糖结合蛋白溶液中,以 使该半乳糖结合蛋白披覆于该几丁质聚醣膜上。 11.如申请专利范围第10项所述之可供细胞生长之 人造薄膜的制造方法,其中该缓冲液包括一含盐之 磷酸缓冲液(PBS)。 12.如申请专利范围第1项所述之可供细胞生长之人 造薄膜的制造方法,其中该几丁质聚醣膜系由去乙 烯化(Deacetylation)一几丁质(Chitin)所得之。 13.如申请专利范围第1项所述之可供细胞生长之人 造薄膜的制造方法,其中该半乳糖结合蛋白系藉由 遗传工程,以重组蛋白所得之。 14.如申请专利范围第1项所述之可供细胞生长之人 造薄膜的制造方法,其中在将该半乳糖结合蛋白披 覆于该几丁质聚醣膜上的步骤之后,更包括利用一 缓冲液对该几丁质聚醣膜进行多数次之清洗。 15.一种可供细胞生长之人造薄膜,包括: 一几丁质聚醣膜;以及 一半乳糖结合蛋白,该半乳糖结合蛋白系直接且完 全地披覆于该几丁质聚醣膜上。 16.如申请专利范围第15项所述之可供细胞生长之 人造薄膜,其中该半乳糖结合蛋白系选自第一型半 乳糖结合蛋白至第十四型半乳糖结合蛋白所组成 之族群。 17.如申请专利范围第15项所述之可供细胞生长之 人造薄膜,其中该人造薄膜系提供3T3纤维细胞生长 。 18.如申请专利范围第15项所述之可供细胞生长之 人造薄膜,其中该人造薄膜系适用于皮肤伤口之癒 合。 19.如申请专利范围第15项所述之可供细胞生长之 人造薄膜,其中该人造薄膜系适用于软骨组织之重 建。 20.如申请专利范围第19项所述之可供细胞生长之 人造薄膜,其中该人造薄膜系披覆于一软骨支架上 。 图式简单说明: 第1图是依照本发明之第一实施例的一种可供细胞 生长之人造薄膜的制程步骤流程图。 第2图是依照本发明之第二实施例的一种可供细胞 生长之人造薄膜的制程步骤流程图。 第3图是利用免疫染色法检验半乳糖结合蛋白披覆 于几丁质聚醣膜上之结果图。 第4图是利用第3图所示之几丁质聚醣膜进行3T3细 胞培养后,所得之总蛋白质含量之统计图。 第5图是利用SEM观察3T3细胞于几丁质聚醣膜贴附之 型态的照片图。 第6A图与第6B图是在经Gal-1单株抗体及TDG处理之几 丁质聚醣膜上进行细胞培养后,所得之总蛋白质含 量之统计图。 第7A图与第7B图是利用光学显微镜与扫瞄式电子显 微镜所得之PLGA三维支架外观的照片图。 第8图是老鼠之软骨细胞IRC于PLGA支架之生长情形 的照片图。 第9图是利用Gal-1抗体进行免疫染色法检验第一型 半乳糖结合蛋白(Gal-1)披覆于PLGA支架上的结果图 。 第10A图与第10B图分别是经Gal-1基因转殖成功之IRC 细胞与一般IRC细胞其细胞型态与增生速率结果图 。 第11图是软骨细胞IRC于披覆有Gal-1及几丁聚醣膜之 PLGA支架之生长与贴附结果图。 第12图是软骨细胞IRC在TDG抑制下于PLGA支架之生长 与贴附结果图。 |
