一种测定大豆子叶细胞数的方法

摘要

一种测定大豆子叶细胞数的方法，它涉及一种测定大豆子叶细胞数的方法。它解决了现有大豆子叶细胞数目测定方法存在测定步骤繁琐、操作复杂、测定结果不够准确的问题。本发明测定大豆子叶细胞数的方法按如下步骤进行：一、烘干、研磨；二、铬酸溶解；三、取样、测定；四、计算：即得到大豆子叶细胞数。本发明测定大豆子叶细胞数方法的优点是能较准确地测定出子叶细胞数目，测定步骤简单，操作方便，测定结果更精确。本发明为正确评价不同粒重基因型大豆的子叶细胞数目与灌浆速率、干物质积累及激素动态的关系提供了重要的技术支持。

主权项

1、一种测定大豆子叶细胞数的方法，其特征在于测定大豆子叶细胞数的方法按如下步骤进行：一、烘干、研磨：将大豆籽粒放置于烘箱中，于30～35℃条件下烘干24～48小时，用万分之一天平对籽粒进行称重，然后置于研钵中充分研磨；二、溶解：取50～100mg的粉末精确称重，然后放置于50ml烧杯中，加入质量浓度为10～20％铬酸溶液10ml，放置48小时后再加入质量浓度为10～20％铬酸溶液10ml，放置24小时后，再次加入质量浓度为10～20％铬酸溶液10ml放置12小时，期间用涡旋器搅拌直至粉末完全溶解；三、取样、测定：测定时用玻璃棒缓慢搅拌使悬浮液中细胞分布均匀，用移液枪取3～5μl悬浮液置于血球计数板上，于显微镜下读数，记录显微镜视野下的子叶细胞数目；清洗血球计数板，再次用移液枪取3～5μl悬浮液置于血球计数板上，于显微镜下读数并记录显微镜视野下的子叶细胞数目，以上操作共进行15次重复；四、计算：由已知血球计数板计数池的容积及全部悬浮液的容积算出溶液中全部子叶细胞数目；设大豆籽粒干重为W，籽粒中子叶细胞数目为X，粉末干重为W1，已测定溶液中全部子叶细胞数目为A；则大豆子叶细胞数目的计算公式为，W∶W1＝X∶A，即X＝A×(W/W1)。