摘要 |
Procédé de détermination qualitative et quantitative d'au moins un acide nucléique amplifié in vitro dans une chambre de réaction fermée. Selon ledit procédé il y a au moins une substance (sonde) pendant ou après l'amplification des acides nucléiques, qui entre en interaction avec l'acide nucléique qu'il faut identifier, des paramètres mesurables de manière spectroscopique de la substance (sonde) subissent un changement et un signal mesurable est produit à cette occasion, l'échantillon à mesurer est soumis à l'influence d'un gradient pouvant dénaturer au moins partiellement les acides nucléiques, le paramètre mesurable qui se modifie sous l'effet du gradient est mesuré, et la réaction globale d'amplification, y compris la détermination qualitative et quantitative, peut s'opérer dans une chambre de réaction fermée (compartiment de mesure) qui ne sera pas ouverte pendant le déroulement des opérations. La méthode se fonde sur une comparaison du nombre de copies et de la séquence d'un ADN ou d'un ARN à analyser par rapport à une référence interne, à l'aide d'un gradient temps-température. L'identification s'opère au moyen de procédés optiques dans des phases homogènes ou hétérogènes et ne nécessite pas de techniques de séparation électrophorétiques. Le processus réactionnel amplifié peut demeurer fermé pendant et après l'analyse. Cela permet par exemple une élimination par des processus réactionnels amplifiés, évitant tout risque de contamination. |