一种快速鉴定食用向日葵杂交种SH361真实性和纯度的方法

摘要

本发明公布了一种快速鉴定食用向日葵杂交种SH361真实性和纯度的方法，通过在大量的SSR引物中筛选出SR-57、SR-123、SR-830、SR-1040和SR-1164，并在上述引物下获得了适于以食用向日葵杂交种SH361及其亲本标准向日葵种子A436和R06-1264-1的基因组DNA为模板的PCR扩增反应的最优组合，对比通过凝胶电泳处理获得的食用向日葵杂交种SH361及其标准向日葵种子A436和R06-1264-1的电泳图谱，判定所述食用向日葵杂交种SH361真实性和纯度的鉴定，该方法方便、快捷，操作步骤简单，能够在短时间内对大量的待测食用向日葵杂交种SH361进行快速鉴定，测定结果准确。

主权项

一种快速鉴定食用向日葵杂交种SH361真实性和纯度的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)分别取由待测食用向日葵杂交种SH361、以及标准向日葵种子A436和R06‑1264‑1种植得到的向日葵真叶为材料，利用常规CTAB法提取上述各食用向日葵的基因组DNA；(2)以步骤(1)所得的各所述基因组DNA为模板，设计如下SR‑57、SR‑123、SR‑830、SR‑1040和SR‑1164引物中的至少一种，分别对各所述基因组DNA进行PCR扩增；SR‑57‑F:5’‑TTCCATTTCCACCATTTTGG‑3’；SR‑57‑R:5’‑CATTCATGGCCTAAAAGGTTC‑3’；SR‑123‑F:5’‑GAAAACCCATGCAGGCATAC‑3’；SR‑123‑R:5’‑ACATCCATCACAGTCCATTTTG‑3’；SR‑830‑F:5’‑CAAGTGCATTAGGTGGTTCTAACA‑3’；SR‑830‑R:5’‑GCCCTCTGACTGTTGTATGACTG‑3’；SR‑1040‑F:5’‑CTGCTGATCGTTTCTTGGATAGA‑3’；SR‑1040‑R:5’‑TGCTAATCCTTCTAATCAACTTCCAC‑3’；SR‑1164‑F:5’‑TGATCAACCTTTGTGATTTGGAG‑3’；SR‑1164‑R:5’‑ATCTTTGACTCCCTCGCTTTCT‑3’；(3)分别将步骤(2)获得的各样本PCR扩增产物进行6％尿素变性聚丙烯酰胺凝胶电泳处理，得到所述食用向日葵杂交种SH361以及其亲本标准向日葵种子A436和R06‑1264‑1的电泳图谱；(4)对比上述杂交种SH361以及其亲本标准种子A436和R06‑1264‑1的电泳图谱，若所述杂交种SH361同时具有其亲本标准种子A436和R06‑1264‑1的特征谱带，则判定所述待测食用向日葵杂交种SH361为真实；反之，为假；所述待测食用向日葵杂交种SH361纯度按照公式所述杂交种SH361同时具有其亲本标准种子A436和R02‑1264‑1的特征谱带的样本种子数/检测的样本种子总数×100％计算得到。