交联壳聚糖－季铵化水解胶原蛋白制备方法

摘要

一种交联壳聚糖－季铵化水解胶原蛋白制备方法，涉及抗菌生物材料制备方法。本发明方法以蚕蛹甲壳素和水解胶原蛋白为原料，按比例将两种溶液混合均匀，加入交联剂进行交联反应后，再进行膜浓缩，调节其pH值并定容或喷雾干燥成粉末。用本发明方法可方便灵活地制备出呈溶液或凝胶状的产品，在其成品溶液中可添加各种水溶性的功能因子，如皮肤生长因子、保湿因子、维生素等，可衍生出多功能生物敷料，具有附着力强，抗菌性及透气性均好，并能被酶降解等特性，可广泛用于人体皮肤、创伤伤口、毛发等的营养与修复及杀菌、保湿等，因此，本发明是一种制备生物敷料的新方法。

主权项

1.一种交联壳聚糖-季铵化水解胶原蛋白制备方法，其特征在于制备的方法步骤如下：(1)制备季铵化水解胶原蛋白浓缩液或粉取蛋白质浓度为25％-35％，平均分子量为3500-4000D的水解胶原蛋白原料，用氢氧化钠溶液，调节并控制其pH为8.0-9.0后，按照水解胶原蛋白∶季铵化试剂体积比为2.5-3.0∶1的比例混合均匀后，在60-75℃温度下，加入活性物浓度为30％-40％的季铵化试剂，连续反应1.5-2小时，用稀盐酸调节其pH值为4.5-5.0，再进行真空抽滤，其抽滤液在真空下浓缩成浓度为25％-30％、平均分子量为3800-4300D的季铵化水解胶原蛋白浓缩液，或将抽滤液在进风温度为155-165℃、出风温度控制在85-95℃，喷雾电机转速控制在9000-10000转/分条件下干燥成粉；(2)配制季铵化水解胶原蛋白液取制备的平均分子量为3800-4300D的季胺化水解胶原蛋白粉，加入重量为其4-5倍的纯净水，搅拌下溶解，配制成25％-30％的季铵化水解胶原蛋白浓缩液，或取浓度为25％-30％的季铵化水解胶原蛋白浓缩液；(3)制备蚕蛹壳聚糖将蚕蛹甲壳素粉末原料分散于重量为其10-15倍、浓度为40％-50％的氢氧化钠溶液中，在100℃-110℃温度下进行回流处理，每2-3小时更换一次NaOH溶液，共换液4-5次，用热水洗涤至中性，再用重量为蚕蛹甲壳素粉末5-8倍的20％-25％ HCl溶液在80℃-90℃下处理13-14小时，然后用NaOH溶液中和，过滤，并在60℃-70℃温度下烘干；(4)制备壳聚糖溶液将第(3)步制备获得的蚕蛹壳聚糖用重量为其50-100倍、浓度为1％-2％的HCl 溶液溶解后，并用NaOH溶液调节其pH值为4.75-5.25；(5)制备交联壳聚糖-季铵化水解胶原蛋白溶液将第(2)步配制获得的季铵化水解胶原蛋白浓缩液和第(4)步制备获得的蚕蛹壳聚糖溶液按照季铵化水解胶原蛋白浓缩液∶蚕蛹壳聚糖溶液的体积比为1-2∶1混合均匀，逐渐加入相当于季铵化水解胶原蛋白浓缩液重量0.5％-1.0％的交联剂，在温度为25℃-40℃搅拌下反应0.5-1.0小时，然后用转速3000r/min-4000r/min的离心机分离20-30min，将分离出的溶液装入截留分子量为8000-10000D的透析管中，用pH为4.75-5.25的乙酸缓冲溶液进行透析，最后，用分子量为20000D-30000D的聚乙二醇进行膜浓缩；(6)制备交联壳聚糖-季铵化水解胶原蛋白成品用5％-10％乙酸钠调节交联壳聚糖-季铵化水解胶原蛋白溶液的pH值为6.5-7.0并用纯净水定容，或将调节pH值并定容的交联壳聚糖-季铵化水解胶原蛋白的溶液成品在进风温度为180℃-200℃、出风温度为90℃-80℃、喷雾电机转速控制在9000-10000转/分条件下进行喷雾干燥成粉。