| 主权项 |
1.一种从鸡冠中提取制备透明质酸钠制剂的方法，其特征在于该方法包括下列步骤：一.原料处理取新鲜鸡冠或冷藏解冻的鸡冠，用水洗净表面污物、剪去冠尖、冠叶以及附带在鸡冠上含鸡毛的鸡皮等，同时去除鸡冠中所含的淤血块。用水漂洗数次后用蒸馏水漂洗3次，沥干后，置电动绞肉机中绞碎，粉碎的鸡冠组织用乙醇或丙酮浸渍，换浸渍液3次后将该鸡冠组织沥干备用；二.鸡冠组织消化取上述沥干的鸡冠组织，加入2倍量蒸馏水进行热萃取，热萃取的温度30～50℃，萃取时间为2～8小时，然后进入酶消化，(1)胃蛋白酶消化，消化条件为PH1.0～4.0，反应温度25～45℃，消化时间1～6小时，酶用量每公斤原料为10～50克胃蛋白酶。(2)胰蛋白酶消化，消化条件为PH6.0～9.0，反应温度30～50℃，消化时间1～6小时，酶用量每公斤原料为1～20克胰蛋白酶，消化完毕后升温60～80℃，保温10～30分钟，自然冷却至室温备用；三.季铵盐沉淀及解离液分离取上述消化液，加1～5倍量蒸馏水稀释，依据总体积按重量体积比，加入硅藻土，硅藻土用量为1～5％(w/v)，搅拌均匀后，用真空抽滤法或高速离心法，去除硅藻土，收集澄清上清液，量取体积，加入季铵盐，搅拌、静置，收集沉淀物、废弃上清液，收集的沉淀物称重，用解离液解离，解离后备用；四.有机溶液分离取上述解离液，量取体积，按重量体积比加入硅藻土，硅藻土用量为1～5％(w/v)，搅拌1～3小时后，用真空抽滤法或高速离心法，去除硅藻土，收集上清液，量取体积，根据体积加入1～5倍量的乙醇或丙酮，搅拌、静置、过滤，收集沉淀物，脱水干燥后得透明质酸钠干粉备用；五.除菌过滤取上述的脱水干燥后的透明质酸钠干粉，用蒸馏水配成一定浓度(0.01～～2％)，用0.3um醋酸纤维膜进行除菌过滤，收集除菌滤液，加入1～5倍量无菌丙酮或乙醇过滤，收集沉淀物，真空干燥后得无菌的透明质酸钠制品备用；六.配制灌装透明质酸钠医用制剂取上述无菌的透明质酸钠制品干粉，用无菌配制液将该品配制为0.5-2％浓度的液体或胶体制剂，然后进行灌装可以装在瓶内，亦可直接装入注射器中。 |
