红毛五加多糖、提取及提纯方法、组成分析方法及用途

摘要

本发明涉及一种红毛五加多糖的提取方法、提纯方法、组成分析方法以及该提纯后的红毛五加多糖及其用途，所述提取方法包括A、原料预处理；B、分步酶解；C、液液萃取；D、醇沉，得红毛五加粗多糖，该方法通过独特的原料预处理、分步酶解等技术特征的组合/协同作用，从而以良好的产率和纯度而得到了红毛五加粗多糖；在得到粗多糖的基础上，通过离子柱层析和：凝胶柱层析而得到了纯度很高的提纯后多糖，进而通过独特的组成分析方法对该多糖进行了组成分析，明确了其组分构成，并发现该提纯后多糖可用于调节T细胞亚群和/或提高IgM表达水平，从而可用于医药领域。

主权项

一种红毛五加粗多糖的提取方法，所述方法包括如下步骤：A、原料预处理；B、分步酶解；C、液液萃取；D、醇沉，得红毛五加粗多糖；所述步骤A具体如下：将干燥的红毛五加茎皮粉碎，过100目筛，得到红毛五加粉末；将该粉末用丙酮浸泡，使其充分膨胀，然后过滤，得到膨胀后粉末；将该膨胀后粉末加入到索氏抽提器中，用乙酸乙酯与氯仿的混合溶剂回流提取1‑2小时，趁热过滤，得到料渣；将料渣充分干燥完全，得到干燥残渣；所述步骤B具体如下：B1：室温下，将步骤A的干燥残渣加入去离子水中，再加入混合酶，搅拌完全，得到残渣酶溶液；调节该溶液的pH为6.5‑7.5，在温度T1下保温酶解50‑120分钟，得到初次酶解液；B2：将初次酶解液进行梯度升温，当温度达到T2时，加入木瓜蛋白酶，并在该温度下保温酶解40‑70分钟，然后以10‑15℃/分钟的升温速率将温度升高至沸腾，保持10‑15分钟，使酶灭活，得到二次酶解液所述步骤C具体如下：C1：将步骤B2得到的二次酶解液过滤，将所得滤液浓缩至其体积的1/10‑1/20，得到浓缩液，然后离心，分离出上清液1；将上清液1再次离心，分离出上清液2；C2：将乙酸乙酯加入到上清液2中，充分振荡、混合，静置分层，分出水相。