醛脱氢酶、其重组表达转化体及在他汀前体合成中的应用

摘要

醛脱氢酶、其重组表达转化体及在他汀前体合成中的应用。本发明涉及一种催化活性高、立体选择性好、底物耐受性好的醛脱氢酶LeADH及其突变体，含有该酶及突变体基因的重组表达载体和重组表达转化体，重组LeADH的制备，以及LeADH在制备他汀药物中间体(3R,5S)‑6‑氯‑2,4,6‑三脱氧‑D‑赤型吡喃己糖内酯(CTeHL)中的应用。所述氧化酶为来源于长孢洛德酵母的醛脱氢酶，以NADP⁺为辅酶，反应生成的还原型辅酶NADPH在NADPH氧化酶NOX的催化下，以氧气作为氧化剂，实现NADP⁺的氧化再生。与现有技术相比，本发明所述酶法催化制备CTeHL的方法无须使用环境污染严重的化学氧化剂，绿色环保，并且具有反应条件温和、底物浓度高等优点，因此在降血脂药物他汀中间体的工业生产中具有很好的应用前景。

主权项

一种醛脱氢酶，其特征在于，其为NADP⁺依赖型的醛脱氢酶，是如下(a)或(b)的蛋白质：(a)：如序列表中SEQ ID No.2所示氨基酸序列的蛋白质；(b)：由SEQ ID No.2所示氨基酸序列的第87位异亮氨酸残基、127位缬氨酸、150位脯氨酸残基、217位谷氨酸、235位天冬酰胺残基和第236位脯氨酸残基经过一个或多个氨基酸替换后形成的活性提高的新氨基酸序列的蛋白质。