用于细胞信号途径的细胞计数分析的全血制备

摘要

本发明涉及用于细胞信号途径的细胞计数分析的全血制备，具体地说，本发明涉及用于测量蛋白表位的生物样品的制备方法，该方法使得可以保持细胞内蛋白表位和基于俘获表位的瞬时激活态的能力检测信号转导途径。本发明提供的方法使得可以快速固定含有红细胞的生物样品，以保证信号转导分子的表位和其他细胞内蛋白表位保持在活化态。本发明的方法进一步使得可溶解红细胞，因此使其成为一种用于对生物样品进行细胞计数分析的有用方法，所述生物样品包括例如全血、骨髓抽吸物、腹膜液以及其他含红细胞样品。本发明还提供了一种复原或“暴露”细胞内抗原上由于固定样品所需的交联固定剂而导致隐蔽的表位。重要的是，本发明的方法使得可以保持和分析直接取自患者的生物样品中磷酸基表位水平以确定疾病特异性特征。

主权项

1.一种用于测量蛋白表位的含有红细胞的生物样品的制备方法，该方法使得能保留用于检测的细胞内蛋白表位，该方法包括如下步骤：(a)固定步骤，该固定步骤包括将所述样品与固定剂接触，其中所述固定剂的加入量使得所达到的终浓度足以交联蛋白质、脂质和核酸分子；(b)去污剂步骤，该去污剂步骤包括向所述样品中加入去污剂，其中所述去污剂的加入量使得所达到的终浓度足以溶解所述红细胞和透化白细胞；以及(c)标记步骤，其中所述样品与对一个或多个表位具有特异性的可检测结合剂接触。