一种大豆对烟粉虱病毒病抗性的接种鉴定方法

摘要

本发明公开了一种大豆对烟粉虱病毒病抗性的室内接种鉴定方法，该方法步骤如下：（a）、获取大田烟粉虱并分离纯化出大量整齐一致的烟粉虱成虫；（b）、繁育并分离筛选出大量整齐一致3龄烟粉虱若虫；（c）、对获取的3龄烟粉虱若虫饲毒；（d）、计量烟粉虱若虫；（e）、将待测大豆品种与带毒3龄烟粉虱若虫定量共育传毒；（f）、大田显症统计：将待测大豆移栽至大田隔虫网室，大田显症后调查统计大豆烟粉虱病毒病株发病率，即可准确鉴定出待测大豆品种的抗病能力。本发明的室内接种鉴定方法克服了排趋性的干扰和烟粉虱获取规模量的难题，实现了定量而强化的大豆烟粉虱病毒病的接种鉴定，能够准确地评价大豆品种对大豆烟粉虱病毒病的抗性水平。

主权项

一种大豆对烟粉虱病毒病抗性的接种鉴定方法，其特征在于：所述的接种鉴定方法步骤如下：（a）、采用夜间趋光诱捕法从田间采集烟粉虱后通过纯化筛选装置获取大量烟粉虱成虫；（b）、将筛选获得的烟粉虱成虫接种到作物昆虫共育箱内培育的棉花上共育并繁育下一代烟粉虱若虫，并进一步利用调整的纯化筛选装置分离获取大量整齐一致的3龄烟粉虱若虫；（c）、将筛选获得的3龄烟粉虱若虫移入栽有烟粉虱重灾区取材的大豆病株上进行饲毒，3龄烟粉虱若虫饲毒后计重获得单头3龄烟粉虱若虫的重量；（d）、通过精密电子天平称重获得单头3龄烟粉虱若虫的重量，根据确定的虫/株比例计算所需烟粉虱总重，进而称重定量；（e）、根据确定的虫/株比例将饲毒后的定量3龄烟粉虱若虫接种到作物昆虫共育箱内栽培的待测大豆品种幼苗上共育传毒；（f）、待烟粉虱半数死亡时将待测大豆移栽至大田隔虫网室，常规栽培管理，大豆显症后调查株发病率，根据株发病率能够准确鉴定出待测大豆品种的抗病能力；所述步骤（a）中的烟粉虱收集时间为大田烟粉虱爆发季节；所述步骤（a）中的纯化筛选装置使用时，采用孔径为45目和55目的分样筛组合可以有效分离出大量整齐一致的烟粉虱成虫；所述步骤（b）中的烟粉虱成虫接种到作物昆虫共育箱内培育的棉花上时，与烟粉虱成虫共育的棉花为2～3叶期；所述步骤（b）中的作物昆虫共育箱的培养温度控制在27℃、光14h/暗10h；所述步骤（b）中的作物昆虫共育箱内繁育下一代烟粉虱若虫后，此时筛选装置翻转90°将垂直的趋光方向改变为水平方向，采用孔径为90目和120目的分样筛组合以有效分离获得大量整齐一致的3龄烟粉虱若虫；所述步骤（c）中的大豆病株为上一年自烟粉虱重灾区取材后于‑20℃的冰箱冷藏的，待病株自然解冻后将根用浸水脱脂棉包裹并用塑料布包扎结实模拟大田移栽方式垂直固定于作物昆虫共育箱内，然后移入3龄烟粉虱若虫饲毒48h；所述步骤（d）中的3龄烟粉虱若虫饲毒后趋光分离毛刷刷离烟粉虱若虫时夹杂的杂质和死虫，然后转移部分烟粉虱若虫进称量瓶，通过精密电子天平称重，去皮计算瓶内烟粉虱若虫的总重后根据瓶内烟粉虱若虫的数量，计算得到单头烟粉虱若虫的重量，以根据待测大豆株数和接种强度确定饲毒烟粉虱若虫数目，进而计算接种所需饲毒烟粉虱若虫重量并称重定量；所述步骤（e）中的待测大豆生长处于2～3叶期，且待测大豆按照40cm²/株的比例留取长势健康均匀的大豆苗；所述步骤（e）中的待测大豆按照50～150虫/株的比例接种饲毒后的3龄烟粉虱若虫，作物昆虫共育箱的培养温度控制在27℃、光14h/暗10h共育传毒至接种的烟粉虱自然衰老死亡。