发明名称 |
人神经干细胞的培养方法 |
摘要 |
本发明公开了一种人神经干细胞的培养方法,包括以下步骤:1、配制由DMEM和F12以1∶1混合而成的基础培养液、胰岛素、盐酸丁二胺、硒化钠、氢化可的松、L-谷氨酰胺、人转铁蛋白和黄体酮组成的人神经干细胞培养基;2、即时采集病员本人自体血清;3、将采集的病员本人自体血清加入配制出的人神经干细胞培养基中,在35℃~38℃、加3~7%的CO<SUB>2</SUB>温箱孵育。本发明方法简单,可重复性强,操作简便易行;为有关神经干细胞及其应用的科研、教学、临床应用等能起到不可估量的作用,同时也孕育着巨大的社会效益和经济效益。 |
申请公布号 |
CN1171991C |
申请公布日期 |
2004.10.20 |
申请号 |
CN02134313.6 |
申请日期 |
2002.07.08 |
申请人 |
徐如祥;姜晓丹 |
发明人 |
徐如祥;姜晓丹 |
分类号 |
C12N5/00 |
主分类号 |
C12N5/00 |
代理机构 |
广州知友专利代理有限公司 |
代理人 |
宣国华 |
主权项 |
1、一种人神经干细胞的培养方法,其特征在于由以下步骤组成:(1)配制人神经干细胞培养基,该培养基的配制步骤为:a、取DMEM和F12按1∶1混合而成的基础培养液,加纯净水至浓度为10~25g/L,并充分搅拌溶解,制得细胞的一般基础培养液;b、再取胰岛素、L-谷氨酰胺、盐酸丁二胺、硒化钠、人转铁蛋白、氢化可的松、黄体酮依次加入基础培养液中,充分搅拌均匀;c、以1~10当量浓度的氢氧化钠调pH为7.4~8.0;d、层流细胞培养室抽滤消毒,4℃储存备用;(2)取步骤1配制出的人神经干细胞培养基,取新鲜血清加入培养基中,血清的含量为培养基的5~20%;将加入血清的培养基置于培养箱,在35℃~38℃、加3~7%的CO2温箱孵育11~21天。 |
地址 |
510282广东省广州市工业大道253号珠江医院神经外科 |