发明名称 | 通用型基因打靶载体的构建方法 | ||
摘要 | 本发明公开了一种通用型基因打靶载体的构建方法,该方法选择正选基因(neo)和两个负选基因(HSV-tk1),其中,在正选基因(neo)的两端加入Loxp序列,将正选基因(neo)和两个负选基因(HSV-tk1)分别连入克隆载体pGEM-3Z,合成含有Bsp14071,Nhe1,Not1,Bsu151(Cla1),Bst11071,Pf12311,Spe1,Pst1,Sac II稀少酶切位点的序列,将这段序列插入正选基因(neo)和两个负选基因(HSV-tk1)之间,正选基因(neo)和两个负选基因(HSV-tk1)之间的酶切位点为稀少的酶切位点,从而便于不同基因作为同源臂插入。在基因打靶载体正选基因的两端加上Loxp序列便于后续工作中去除正选基因。 | ||
申请公布号 | CN101117636A | 申请公布日期 | 2008.02.06 |
申请号 | CN200710017948.8 | 申请日期 | 2007.05.29 |
申请人 | 西北农林科技大学 | 发明人 | 陈兴启;张涌;孙达权;刘凤军;张玉玲 |
分类号 | C12N15/63(2006.01) | 主分类号 | C12N15/63(2006.01) |
代理机构 | 西安通大专利代理有限责任公司 | 代理人 | 李郑建 |
主权项 | 1.一种通用型基因打靶载体的构建方法,其特征在于,该方法选择正选基因(neo)和两个负选基因(HSV-tk1),其中,在正选基因(neo)的两端加入Loxp序列,将正选基因(neo)和两个负选基因(HSV-tk1)分别连入克隆载体pGEM-3Z,合成含有Bsp14071,Nhe1,Not1,Bsu151(Cla1),Bst11071,Pf12311,Spe1,Pst1,Sac II稀少酶切位点的序列,将这段序列插入正选基因(neo)和两个负选基因(HSV-tk1)之间,正选基因(neo)和两个负选基因(HSV-tk1)之间的酶切位点为稀少的酶切位点,从而便于不同基因作为同源臂插入。 | ||
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