一种在蛋白质芯片表面固定蛋白质的方法

摘要

本发明涉及一种在蛋白质芯片表面固定蛋白质的方法。该方法使用组分A和组分B的无水乙醇溶液浸泡蛋白质芯片，所述组分A为能够使蛋白质芯片表面呈疏水性的有机化合物；所述组分B为一端含有能够与所需固定的蛋白质分子以共价连接的活性基团、一端含有极性基团的有机化合物；然后使用常规方法活化组分B的极性基团；最后将此蛋白质芯片放入所需固定的蛋白质溶液中浸泡。该方法固定的蛋白质比较稳定；而且能够有效降低蛋白质芯片表面与蛋白质分子间的相互作用，减少蛋白质芯片表面对蛋白质分子的空间构像的影响；通过这种方法固定的蛋白质的生物活性比通过物理吸附或单纯组分B固定的蛋白质生物活性提高1倍以上。

主权项

1、一种在蛋白质芯片表面固定蛋白质的方法，包括如下的步骤：1)配制组分A和组分B的无水乙醇溶液，其中组分A的浓度为1毫摩尔～1摩尔，组分A和组分B的摩尔比为20～100∶1；所述组分A为能够使蛋白质芯片表面呈疏水性的有机化合物；所述组分B为一端含有能够与所需固定的蛋白质分子以共价连接的活性基团、一端含有极性基团的有机化合物；2)将蛋白质芯片的基片放置于步骤1)的溶液中浸泡30分钟～5小时进行改性；用无水乙醇清洗固体基片3次；再使用常规方法活化组分B的极性基团；3)将所需固定的蛋白质溶液中加入0.05～1wt％非离子型表面活性剂；4)将步骤2)改性的蛋白质芯片的基片放入步骤3)的蛋白质溶液中浸泡30分钟。