一种无囊膜病毒量子点标记方法及应用

摘要

本发明公开了一种无囊膜病毒量子点标记方法及应用。通过将生物素化的病毒悬液离心，获得结构均一、生物素化的无囊膜病毒；再接种于易感细胞，加量子点孵育，即可获得被量子点标记的无囊膜病毒。利用已标记的无囊膜病毒、结合对无囊膜病毒外衣壳蛋白免疫荧光标记、以及对细胞特定组分荧光蛋白定位，实现对无囊膜病毒活体在入侵过程中的动态示踪及无囊膜病毒与宿主细胞互作组分的定位。同时还可用于实时监测病毒入侵宿主细胞途径，特别适用于在鱼类无囊膜病毒与宿主细胞互作组分鉴定，还适用于在抗鱼类呼肠孤病毒制剂筛选和研发中的应用。

主权项

一种无囊膜病毒量子点标记方法，包括如下步骤：1）在无囊膜病毒悬液中，加入生物素孵育，进行无囊膜病毒的生物素化；2）超速离心除去不完整的无囊膜病毒颗粒及其他杂质；先将生物素化的病毒悬液离心，收集沉淀，加入PBS缓冲液悬浮，经不连续蔗糖密度梯度离心，分别收集各离心条带，加PBS洗涤后离心，收集沉淀，重悬于TE缓冲液中，负染电镜观察，获得结构均一、生物素化的无囊膜病毒；3）将步骤2）获得的生物素化无囊膜病毒接种于易感细胞，加量子点孵育，进行无囊膜病毒量子点标记。