一种三磷酸胞苷的晶胶吸附层析分离方法

摘要

本发明涉及一种利用超大孔连续床晶胶层析技术(Supermacroporous Cryogel Chromatography，简称晶胶层析)从微生物发酵液中分离三磷酸胞苷(CTP)的方法。所述方法是，首先将微生物发酵液的pH值调为酸性，以一定流速通过阴离子交换型超大孔连续床晶胶介质床柱，进行吸附；然后，用冲洗液冲洗床柱，去除柱内残留的发酵液和杂质，用洗脱液分步洗脱，得到纯度较高的CTP。本发明提供的方法将现有CTP分离工艺中的菌体过滤、乙醇沉淀、阳离子交换、阴离子交换树脂吸附等多个步骤简化为通过晶胶吸附层析一步实现，工艺简单，料液在柱内停留时间短，分离迅速，处理流速高，分离过程成本低，得到的CTP纯度高，晶胶介质可方便地进行再生，重复使用，规模化生产分离十分方便。

主权项

1.一种三磷酸胞苷的晶胶吸附层析分离方法，所述方法如下：(1)将含有三磷酸胞苷的混合液调pH为酸性，以0.1～30cm/min流速上超大孔连续床晶胶介质床柱，进行吸附；所述晶胶介质为阴离子交换晶胶介质，所述阴离子交换晶胶介质的孔径为5～400μm、孔隙率为50～98％、功能基团为胺基或其衍生基团；(2)以去离子水或pH值1～6的稀酸溶液为冲洗液冲洗床柱，除去晶胶介质内残留的混合液；(3)用洗脱液进行洗脱，收集含三磷酸腺苷的洗脱峰，得到所述的三磷酸腺苷，所述的洗脱液为含有0.001～3M碱金属盐的稀酸溶液。