一种具有乳腺癌化疗增效活性的乌贼墨制剂的制备方法及其应用

摘要

本发明涉及一种具有乳腺癌化疗增效活性的乌贼墨制剂的制备方法及其应用，属于生物工程技术领域；本发明制备方法的步骤为：取乌贼墨汁，加入PBS，充分研磨后，进行超声波处理，然后离心去沉淀，于上清液中加入木瓜蛋白酶，水浴孵育，冷却后，离心去沉淀，上清液中加入氯仿与正丁醇混合液，充分混合后离心，取上层黄色清液，重复混合离心2~3次，合并黄色清液，采用旋转蒸发仪浓缩，浓缩液中加入无水乙醇，静置后离心，取沉淀，喷雾干燥后粉碎成细末，填入硬胶囊即可；本发明的乌贼墨制剂能抑制乳腺癌细胞活力与转移，还能通过抑制顺铂诱导的细胞自噬而协同增强顺铂促进三阴乳腺癌细胞的凋亡而实现杀伤作用，可用于肿瘤化疗的辅助治疗。

主权项

一种具有乳腺癌化疗增效活性的乌贼墨制剂的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）取冷冻乌贼墨囊于4℃解冻，取出墨汁，加入1~3倍体积冰冷的磷酸盐缓冲液PBS，充分研磨后，进行超声波处理；（2）超声波处理的悬混液于4℃搅拌浸泡48~72小时，然后4℃离心60min，离心机转速为8000rpm；（3）离心液去沉淀，于上清液中加入木瓜蛋白酶，浓度至0.15%，55℃水浴孵育60min；（4）再于100℃水浴加热20min，冷却后， 4℃离心60min，离心机转速为8000rpm；（5） 上述离心液去沉淀，于上清液中加入1/4倍体积氯仿与正丁醇混合液，充分混合，4℃静置20min；（6）然后4℃离心60min，离心机转速为8000rpm，移出上层黄色清液备用；（7）重复（5）、（6）步骤2~3次，合并黄色清液，采用旋转蒸发仪浓缩至1/4体积；（8）浓缩液中加入4倍体积的无水乙醇，4℃静置60min；（9）于4℃离心10min，离心机转速为5000rpm，取沉淀，120℃喷雾干燥；（10）将干燥后的粗粉粉碎成细末，填入硬胶囊，每粒0.20~0.30g。