发明名称 |
用环介导等温扩增方法检测河流弧菌的试剂盒及方法 |
摘要 |
涉及一种用环介导等温扩增方法检测河流弧菌的试剂盒及方法,试剂盒包括(1)LAMP反应液A,其中上游内引物为:gtgccttccacatcaccaggattttggtgacctgatcgtcacac;下游内引物为:tccgcagtgactggtcgagtcttttgaagccttggctgacttgg;上游外引物为:tcctgcaagacgaaatggc;下游外引物为:ctcactaaacgtcggtgctc;(2)Bst DNA聚合酶B;(3)显色剂C;检测方法包括:细菌DNA的提取、河流弧菌的环介导等温扩增、显色检测;优点是快速、特异性强、灵敏度高,且成本低。 |
申请公布号 |
CN100584956C |
申请公布日期 |
2010.01.27 |
申请号 |
CN200710026391.4 |
申请日期 |
2007.01.18 |
申请人 |
中国科学院南海海洋研究所 |
发明人 |
任春华;胡超群;罗鹏;王青柏 |
分类号 |
C12Q1/04(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;G01N21/25(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/04(2006.01)I |
代理机构 |
广州科粤专利代理有限责任公司 |
代理人 |
赖汉光 |
主权项 |
1.一种用环介导等温扩增方法检测河流弧菌的试剂盒,其试剂包括:(1)环介导等温扩增反应液A:含有10×Thermopol反应缓冲液、300-500uM dNTP、2-4mM硫酸镁、0.8-1.2uM上游内引物、0.8-1.2uM下游内引物、0.2-0.3uM上游外引物、0.2-0.3uM下游外引物和1-1.5M甜菜碱;其中10×Thermopol反应缓冲液含有200mM pH8.8的三羟基甲基氨基甲烷-盐酸、100mM氯化钾、100mM硫酸铵、20mM硫酸镁和1%曲拉通X-100;上游内引物为:gtgccttccacatcaccaggattttggtgacctgatcgtcacac;下游内引物为:tccgcagtgactggtcgagtcttttgaagccttggctgacttgg;上游外引物为:tcctgcaagacgaaatggc;下游外引物为:ctcactaaacgtcggtgctc;(2)Bst DNA聚合酶B:每微升含8个活性单位(8U/uL);(3)显色剂C:为10%的荧光染料SYBR GREEN I。 |
地址 |
510301广东省广州市海珠区新港西路164号 |