重组胸腺素α1在大肠杆菌中的高分泌表达和分离纯化

摘要

本发明提供重组胸腺素α1(rTα-1)基因、表达质粒pKAT、含有表达质粒pKAT的工程菌YKAT以及从中筛选出的工程菌株YKAT-8。还提供重组胸腺素α1的制备方法，该方法利用大肠杆菌偏爱密码子，设计并化学合成重组胸腺素α1基因，以大肠杆菌碱性磷酸酯酶的启动子和信号肽基因作为启动表达和分泌重组胸腺素α1的上游序列，构建分泌表达质粒pKAT，进而构建并筛选得到工程菌株YKAT-8，该菌株经发酵培养，直接分泌表达rTα-1至培养基中，分泌表达量达到每升500毫克，经分离纯化，得到N端非乙酰化的重组胸腺素α1，纯度大于95％。该方法步骤简单，明显减少生产费用和缩短生产周期，使大规模工业化生产、大规模临床应用成为可能。

主权项

1. 重组胸腺素α1基因，其核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示序列。