大规模液体深层发酵生产亮菌菌丝体菌粉及其多糖工艺

摘要

大规模液体深层发酵生产亮菌菌丝体菌粉及其多糖工艺。本发明以大规模液体深层发酵生产亮菌菌丝体菌粉及其多糖为目标，以山东金乡真菌研究所亮菌真菌为出发菌株，采用斜面菌种进行液体摇瓶培养、液体摇瓶扩大培养、一级种子培养、二级种子培养和三级发酵培养，最终发酵罐体积达10000L－15000L。利用本发酵工艺，在10000L－15000L发酵罐中发酵，发酵液中菌丝体以干重计可达2－3％，干菌粉中多糖含量可达12－18％。如需获取其菌粉，则将发酵液在发酵罐内高速打碎，经浓缩灭菌后，无菌喷雾干燥得菌粉。如需获取其多糖，则将终了发酵液温度加热到90－100℃，搅拌速度为200－250rpm/min，维持2－4小时，用泵将发酵液输送到贮罐中，经板框压滤得到亮菌多糖。

主权项

1、一种亮菌液体深层发酵生产工艺，其特征是：以亮菌真菌为出发菌株，采用斜面菌种进行液体摇瓶培养、液体摇瓶扩大培养、一级种子培养、二级种子培养和三级发酵培养得亮菌菌丝体发酵液；如需获取其菌粉，则将发酵液在发酵罐内高速打碎，经浓缩灭菌后，无菌喷雾干燥得菌粉；或发酵结束后将终了发酵液继续加热到一定温度，搅拌维持一定时间，发酵液经板框压滤得到亮菌多糖；摇瓶培养、摇瓶扩大培养、一级种子培养和二级种子培养的培养基组成以g/100ml计为：葡萄糖1-3，酵母膏0.3-0.7，蛋白胨0.1-0.3，NaCl 0.05-0.2，KH2PO4 0.05-0.2，MgSO4 0.03-0.1，加水定容至所需体积，pH值为4.5-5.0；摇瓶培养的培养条件是培养温度28-30℃，转速120-180rpm/min，培养96-120小时，然后转接入摇瓶进行扩大培养；摇瓶扩大培养的培养条件是培养温度28-30℃，转速120-180rpm/min，培养30-60小时，然后转接入一级种子罐培养，接种量为4-10％；一级种子培养的培养条件是培养温度28-30℃，罐压0.5-0.9kPa，搅拌速率80-150rpm/min，通气量1∶0.3-0.5v/v.m，发酵90-150小时，然后转接入二级种子罐培养，接种量为4-10％；二级种子培养的培养条件是培养温度28-30℃，罐压0.5-0.9kPa，搅拌速率80-150rpm/min，通气量1∶0.3-0.5v/v.m，发酵40-60小时，然后转接入三级发酵罐培养，接种量为4-10％；三级发酵培养基组成以g/100ml计为：葡萄糖2-4，酵母膏0.5-1.5，蛋白胨0.3-0.7，淀粉0.5-2，生长素0.3-0.7，NaCl 0.05-0.15，(NH4)2SO40.05-0.2，KH2PO4 0.1-0.4，MgSO4 0.05-0.15，加水定容至所需体积，pH值为4.5-5.0；培养条件是培养温度28-30℃，罐压0.5-0.9kPa，搅拌速率80-150rpm/min，通气量1∶0.3-0.5v/v.m，发酵100-150小时；三级发酵培养，可选择10000L-15000L发酵罐进行发酵培养。