发明名称 一种噬菌体的冻干保存方法
摘要 本发明提供了一种噬菌体的冻干保存方法,将噬菌体液和噬菌体保存保护剂混合均匀,制备成噬菌体冻干粉,噬菌体冻干粉在无菌条件下密封于安瓿中保存。本发明所述的噬菌体的冻干保存方法,方法合理,应用方便,噬菌体可以在室温保存或者冷藏,对保存环境要求低,适应性好,并且可以长期保存。
申请公布号 CN105950475A 申请公布日期 2016.09.21
申请号 CN201610422048.0 申请日期 2016.06.14
申请人 苏州埃瑞特生物技术有限公司 发明人 许维素;宋增福;陈彪
分类号 C12N1/04(2006.01)I;C12R1/92(2006.01)N 主分类号 C12N1/04(2006.01)I
代理机构 苏州市方略专利代理事务所(普通合伙) 32267 代理人 马广旭
主权项 一种噬菌体的冻干保存方法,其特征在于:包括以下步骤:1)噬菌体溶液于2‑7℃静置4‑8h,出现絮状沉淀,经过8000‑12000r/min离心20‑40min;2)向上述沉淀中加入噬菌体缓冲液,将沉淀溶解,得噬菌体液;3)噬菌体液体积1‑2.5倍的噬菌体保存保护剂混合均匀,所述噬菌体保存保护剂所述氨基酸以重量组分计,包括以下组分:脱脂乳6‑18份、硅藻土 0.3‑0.8份、糖醇2‑5份、DEAE‑葡聚糖 0.8‑1.5份、阿拉伯胶 0.01‑0.16份、牛血清白蛋白 0.7‑1.2份、麦芽糖糊精 0.05‑0.3份、蜂蜜 0.01‑0.08份、棉子糖 0.8‑1.6份、磷酸铝 0.03‑0.06份、氯化钠 0.01‑0.04份、硫酸镁 0.3‑0.7份、氯化钙 0.6‑1.2份、甘油 1‑3份、阿拉西A 0.05‑0.12份和水 100份;4)预降温:将上述混合溶液冷冻降温至5℃,并保持30min;进一步以1℃/min的速度降温到‑5℃,并保持30min;再进一步以1℃/min的速度降温到‑30℃,并保持1h;一级干燥:将上述溶液于‑30℃、80‑150mTorr压强的真空条件下干燥12‑18h;二级干燥:以0.1℃/min的速度,加热上述溶液到25℃,再于上述真空条件下保持4‑8h后得噬菌体冻干粉;5)上述噬菌体冻干粉在无菌条件下密封于安瓿中保存。
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