家蚕中部丝腺生物反应器通用型质粒及其构建方法和应用

摘要

本发明公开了一种家蚕中部丝腺生物反应器通用型质粒及其构建方法和应用。获得丝胶蛋白1基因启动子、His 6序列、DDDDK序列、丝素轻链蛋白信号肽、丝素轻链蛋白基因3’末端序列、家蚕肌动蛋白基因A3启动子、EGFP基因和SV40序列，然后再构建质粒，第一表达框包括A3启动子、EGFP基因和SV40序列，第二表达框包括丝胶蛋白1基因启动子、丝素轻链蛋白信号肽、His 6序列、DDDDK和丝素轻链蛋白基因3’末端序列，且含有ApaI和NheI两个酶切位点。本发明质粒减少了构建donor质粒的工作量，提高了家蚕中部生物反应器工作效率。

主权项

一种家蚕中部丝腺生物反应器通用型质粒，其特征在于：所述的质粒为pBac[A3‑EGFP‑SV40]‑[Ser1promoter‑FLSP‑His 6‑DDDDK‑FLPA]，是以piggyBac转座子为基础并带有Amp抗性基因，包括piggyBac转座子的两个转座臂PBL和PBR以及两个转座臂之间的两个功能表达框。