醇脱氢酶变体

摘要

本申请描述了非天然NAD⁺‑依赖性醇脱氢酶(ADHs)，其与未修饰的对应物相比，能够令甲醇或乙醇向甲醛或乙醛的分别转化提高到至少2倍。还描述了编码所述非天然醇脱氢酶的核酸，和包括所述核酸的表达构建体，以及包括所述核酸或表达构建体的工程细胞。还表述了表达非天然NAD⁺‑依赖性醇脱氢酶的工程细胞，可选地包括一种或多种额外的代谢途径转基因、甲醇代谢途径基因、目标产物途径基因、包括所述细胞的细胞培养物组合物、用于提高所述目标产物或其中间体从细胞的生产的方法、包括所述目标产物或其中间体的组合物，和从所述目标产物或其中间体制得的产物。

主权项

一种工程细胞，(a)所述工程细胞表达与对应醇脱氢酶相比包含至少一个氨基酸置换的非天然的NAD⁺‑依赖性醇脱氢酶，且与表达未包含氨基酸置换的所述对应醇脱氢酶的工程细胞相比，能够将甲醇或乙醇向甲醛或乙醛的转化分别提高到至少两倍；或者，(b)所述工程细胞表达包含至少一个氨基酸置换的非天然NAD⁺‑依赖性醇脱氢酶的第一序列，且与表达NAD⁺‑依赖性醇脱氢酶的第二序列的工程细胞相比，能够将甲醇或乙醇向甲醛或乙醛的转化分别提高到至少两倍，其中所述第一序列和第二序列之间的差异在于所述至少一个氨基酸置换。