一种甜玉米芯多糖的分离纯化方法

摘要

一种甜玉米芯多糖的分离纯化方法，甜玉米芯烘干粉碎，以1:8～12的重量容积比向过筛甜玉米芯加正己烷，室温条件下磁力搅拌1～1.5h，4000r/min离心10～15min，脱脂甜玉米芯在温度100℃、料液比1:18～22、时间2.5～3.5h的条件下进行热水浸提，离心，取上清液。根据异丙醇‑硫酸铵双水相相图，向25mL比色管中加入3～5g硫酸铵，再加入甜玉米芯粗多糖液，硫酸铵完全溶解后，最后加入异丙醇至20mL，形成双水相体系溶液。超声波处理后的双水相体系溶液在分液漏斗中静置分相，分别测定上下相的体积及上下相的多糖和蛋白含量，将双水相分离纯化后获得的多糖溶液于4℃冰箱保存1～2天，有硫酸铵结晶析出后，透析，旋转蒸发浓缩至小体积，最后真空冷冻干燥，即得甜玉米芯多糖。

主权项

一种甜玉米芯多糖的分离纯化方法，其特征在于，步骤一、甜玉米芯多糖溶液的制备：甜玉米芯经烘箱45～55℃干燥，用粉碎机粉碎，过80目筛，以1:8～12的重量容积比向过筛甜玉米芯加正己烷，室温条件下磁力搅拌1～1.5h，4000r/min离心10～15min进行脱脂，室温下晾干沉淀，脱脂甜玉米芯在温度100℃、料液比1:18～22、时间2.5～3.5h的条件下进行热水浸提，离心，取上清液，得到甜玉米芯粗多糖溶液，于4℃条件下贮存备用；步骤二、双水相体系的配置：根据异丙醇‑硫酸铵双水相相图，向25mL比色管中加入3～5g硫酸铵，再加入甜玉米芯粗多糖液，硫酸铵与甜玉米芯粗多糖液的比例为0.175～0.3g/ml，硫酸铵完全溶解后，最后加入异丙醇至20mL，形成双水相体系溶液；步骤三、对双水相体系溶液进行超声波处理：处理条件为25℃、500W、45HZ、10～35min；步骤四、多糖及蛋白含量测定：超声波处理后的双水相体系溶液在分液漏斗中静置分相，分别测定上下相的体积及上下相的多糖和蛋白含量，计算相比、蛋白分配系数、多糖的分配系数和回收率；蛋白含量的测定采用Bradford法，多糖含量的测定采用苯酚‑硫酸法；步骤五、样品的制备：将双水相分离纯化后获得的多糖溶液于4℃冰箱保存1～2天，有硫酸铵结晶析出后，透析，旋转蒸发浓缩至小体积，最后真空冷冻干燥，即得甜玉米芯多糖。