发明名称 一种饮用水消毒工艺出水遗传毒性的体外微核检测方法
摘要 本发明提供了一种饮用水消毒工艺出水遗传毒性的体外微核检测方法,包含以下步骤:1)制备饮用水消毒工艺出水的提取物的溶液;2)用步骤1)的提取物溶液暴露处理离体的永生化人胚胎肾细胞;3)步骤2)处理后的细胞依次进行EMA染色和SYTOX Green染料染色;4)流式细胞仪分析。本发明的检测方法可减少假阳性结果,孔板离心排除碎片干扰,可实现饮用水消毒工艺水样的遗传毒性的快速、微量化、高通量分析,提高了检测方法的敏感性,试验结果易于统一,重现性好,准确可靠。
申请公布号 CN104140997B 申请公布日期 2016.07.20
申请号 CN201310163456.5 申请日期 2013.05.07
申请人 中国科学院生态环境研究中心 发明人 王子健;刘楠楠;马梅;饶凯锋;李娜
分类号 C12Q1/68(2006.01)I 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人 关畅
主权项 一种饮用水消毒工艺出水遗传毒性的体外微核检测方法,包含以下步骤:1)制备饮用水消毒工艺出水的提取物的溶液;2)用步骤1)的提取物溶液暴露处理离体的永生化人胚胎肾细胞;3)步骤2)处理后的细胞依次进行EMA染色和SYTOX Green染料染色;4)流式细胞仪分析,根据被SYTOX Green染料染色但不被EMA染色的颗粒的大小和形态特征,判别微核、细胞核和亚二倍体颗粒,并记录数目,得到微核率和亚二倍体贡献率,进而得出饮用水消毒工艺出水遗传毒性;所述永生化的人胚胎肾细胞为永生化的人胚胎肾细胞HEK293;所述方法中,是将细胞放置在24孔板中进行暴露处理的,在所述步骤3)之后,所述步骤4)之前,包括如下步骤:将所述24孔板离心。
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