发明名称 构建测序文库的方法及装置
摘要 本发明提供了构建测序文库的方法及装置,所述方法包括:(a)在RNA分子的3’端连接第一接头,以便获得第一连接产物;(b)在第一连接产物的5’端连接第二接头,以便获得第二连接产物;(c)对第二连接产物进行反转录,以便获得反转录产物;(d)利用一对PCR引物对反转录产物进行扩增,以便获得PCR扩增产物,其中,一对PCR引物之一含有链霉亲和素;(e)从PCR扩增产物分离单链DNA分子;以及(f)将单链DNA分子进行环化处理,以便获得环化产物,环化产物构成测序文库。该方法可有效用于RNA分子测序文库构建,操作简单、效果好,具有较高的稳定性和可重复性。
申请公布号 CN105986020A 申请公布日期 2016.10.05
申请号 CN201510072010.0 申请日期 2015.02.11
申请人 深圳华大基因研究院 发明人 张春燕;祝珍珍;耿春雨;章文蔚;蒋慧
分类号 C12Q1/68(2006.01)I;C12N15/10(2006.01)I;C12M1/00(2006.01)I;C40B50/06(2006.01)I;C40B60/14(2006.01)I 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 代理人 李志东
主权项 一种针对RNA分子构建测序文库的方法,其特征在于,包括:(a)在RNA分子的3’端连接第一接头,以便获得第一连接产物;(b)在所述第一连接产物的5’端连接第二接头,以便获得第二连接产物;(c)对所述第二连接产物进行反转录,以便获得反转录产物;(d)利用一对PCR引物对所述反转录产物进行扩增,以便获得PCR扩增产物,其中,所述一对PCR引物之一含有链霉亲和素;(e)从所述PCR扩增产物分离单链DNA分子;以及(f)将所述单链DNA分子进行环化处理,以便获得环化产物,所述环化产物构成所述测序文库。
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