一种用于生物蛋白质定量和示踪的N¹⁵稳定同位素标记方法

摘要

本发明公开了一种用于生物蛋白质定量和示踪的N¹⁵稳定同位素标记方法，首先，利用酵母将N¹⁵无机盐转化成生物蛋白，当酵母培养代数达到6代以上，其提取蛋白98％以上都是N¹⁵的蛋白，然后再将酵母中提取高纯度N¹⁵蛋白转化成N¹⁵酵母蛋白胨，利用N¹⁵蛋白胨取代常规的N¹⁴蛋白胨，用于培养多种生物，为生物蛋白质标记定量和示踪提供特异性的N¹⁵同位素标记。本发明方法可应用生物种类多，操作简便，试验成本低，试验周期短，利于人们高效、低成本对大量样品进行蛋白质组分析。

主权项

一种用于生物蛋白质定量和示踪的N¹⁵稳定同位素标记方法，其特征在于：首先，利用酵母将N¹⁵无机盐转化成生物蛋白，当酵母培养代数达到6代以上，其提取蛋白98％以上都是N¹⁵的蛋白，然后再将酵母中提取高纯度N¹⁵蛋白转化成N¹⁵酵母蛋白胨，利用N¹⁵蛋白胨取代常规的N¹⁴蛋白胨，用于培养多种生物，为生物蛋白质标记定量和示踪提供特异性的N¹⁵同位素标记；其包括以下步骤：1)使用只含N¹⁵的无机培养基对酵母菌进行培养；2)酵母细胞的裂解；3)N¹⁵酵母蛋白的粗提；4)N¹⁵生物培养基的配制，即是将步骤3)中粗提后产生的N¹⁵蛋白胨作为培养基的基本原料，取代常规的N¹⁴蛋白胨用于培养，再加入不含N的无机盐物质，制成最终的N¹⁵生物培养基。