| 主权项 |
1一种从透明质酸发酵液中制备透明质酸钠的方法，其特征是采用发酵液加热、过滤去除菌体，添加蛋白酶去除蛋白质，使用超滤技术去除金属离子和小分子的有色物质的方法，具体工艺为加热除菌体、酶解、乙醇沉淀、络合、解离、乙醇沉淀、超滤、乙醇沉淀、洗涤脱水干燥、成品包装而制得成品透明质酸钠，加热除菌体：将发酵液用蒸馏水稀释一倍后将发酵液温度升到75℃～80℃经过滤去除菌体；酶解：将上清液的pH调至8.0，然后按照滤液的体积，以质量体积比0.05％称取碱性蛋白酶，在37℃下酶解3小时；乙醇沉淀：将经酶解后的发酵清液pH调至7.0～7.2，加入与酶解液体积相等的95％乙醇，充分搅拌，静置沉淀HA；沉淀的溶解：将已经沉淀的HA用与初始发酵液等体积的蒸馏水搅拌溶解；络合沉淀：在上述充分溶解的HA水溶液中边搅拌边缓缓地加入发酵液体积0.1倍的5％的氯化十六烷基吡啶水溶液，从而使水溶液中的HA发生络合沉淀，静置使络合沉淀下沉，弃去上清液；解离：将络合沉淀置于与初始发酵液等体积的0.7～0.8mol/L的NaCl水溶液中充分搅拌解离过夜；乙醇沉淀：将充分解离的溶液过滤，解离液再以2倍初始发酵液体积的95％乙醇沉淀，取出沉淀物HA洗涤；超滤：将沉淀物HA用与初始发酵液等体积的蒸馏水溶解，按照下列条件：0.2MPa、截留分子量为5000的聚醚砜超滤膜进行超滤，去除金属离子和小分子的有色物质；乙醇沉淀：将超滤后的滤液加入1％的乙酸钠，再以2倍初始发酵液体积的95％乙醇沉淀，取出沉淀物HA-Na；洗涤脱水干燥：将HA-Na沉淀物用无水乙醇洗涤二次，再用丙酮洗涤一次后真空干燥，即得HA-Na成品；成品包装：将得到的感官品质良好的HA-Na成品进行包装。 |
