分离转录终止序列的方法

摘要

本发明涉及用于鉴定和分离转录终止序列的有效的高通量方法、系统和DNA构建体。本发明还涉及通过所述方法从稻中鉴定和分离的特定终止序列。

主权项

1.用于鉴定和/或分离转录终止序列的方法，所述方法包括以下步骤：i)提供筛选构建体或筛选载体，其包含：a)启动子序列，和b)用于插入DNA序列的一个或多个插入位点，优选限制性或重组位点，和c)至少一个附加序列，所述序列在所述启动子序列下表达时产生易于检测的特征，其中与无插入相比，将有效的转录终止子插入所述插入位点改变了所述附加序列通过所述启动子序列的表达，和ii)提供待评估其转录终止能力的一个或多个DNA序列，和iii)将所述DNA序列的一个或多个拷贝插入所述筛选构建体或筛选载体的所述插入位点，和iv)将带有所述插入的DNA序列的所述筛选构建体或筛选载体引入适于诱导从所述启动子序列表达的体外或体内转录系统，和v)鉴定和/或选择与无插入相比具有改变的易于检测特征的筛选构建体或筛选载体，和vi)从所述鉴定和/或选择的筛选构建体或筛选载体中分离插入的DNA序列用作转录终止序列，并任选地测定它们的序列。