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本発明は、固体支持体を利用した核酸の混合物から核酸を増幅する方法を提供する。各方法は、指向性増幅のためにユーザ定義のプライマーオリゴヌクレオチドを利用して提供する。各方法はまた、定義された長さの増幅された標的核酸を生成するためのブロッカー及びディスプレーサーオリゴヌクレオチドを利用して提供する。試料は、固体支持体に適用され、試料中の標的核酸は、固体支持体に固定された第一オリゴヌクレオチドを結合する。標的結合領域およびポリメラーゼプロモーターシーケンスを含むプライマーシーケンスは、結合した標的核酸にアニーリングされ、第一二本鎖核酸を生成することを拡張する。標的配列は、固体支持体に固定された第二オリゴヌクレオチドに結合する第一核酸を残して除去される。第二オリゴヌクレオチドは、第二核酸を含む第二二本鎖核酸を生成するように拡張される。第二核酸は、ポリメラーゼを添加することにより増幅される。 |
