上昇したレベルの外因性シャペロンを有する細胞抽出物を用いる細菌無細胞合成系における生物活性のあるタンパク質の発現

摘要

本開示には、無細胞合成系における、適正にフォールディングされた生物活性のある目的のタンパク質の発現を改善するための方法および系が記載されている。当該方法および系は、活性な酸化的リン酸化系を有する細菌無細胞抽出物を使用し、外因性タンパク質シャペロンを含む。外因性タンパク質シャペロンは、無細胞抽出物を調製するために使用される細菌によって発現させることができる。外因性タンパク質シャペロンは、タンパク質ジスルフィドイソメラーゼおよび／またはペプチジル−プロリルシス−トランスイソメラーゼであってよい。本発明者らは、タンパク質ジスルフィドイソメラーゼとペプチジル−プロリルシス−トランスイソメラーゼの組合せにより、適正にフォールディングされた生物活性のある目的のタンパク質の量が相乗的に増加することを発見した。