单抗ZUF10免疫磁珠分选人骨髓间充质干细胞的方法

摘要

本发明提供一种用单抗ZUF10免疫磁珠分选人骨髓间充质干细胞的方法，是从骨髓悬液中分离得到单个核细胞，用单克隆抗体ZUF10为标记，通过间接免疫磁珠分选系统正向分选获得ZUF10抗原阳性的人骨髓间充质干细胞。本发明方法获得的人骨髓间充质干细胞具有较好的生长活性及增殖潜能，且细胞传代过程中ZUF10抗原稳定表达，并可在体外定向诱导分化为脂肪细胞、成骨细胞、神经元样细胞。本发明提供的是一种较理想的入骨髓间充质干细胞分选纯化的方法，提高了原代间充质干细胞的纯度及分离培养的效率，有助于间充质干细胞生物学特性的研究及在临床检测和应用中的推广。

主权项

1.一种用单抗ZUF10免疫磁珠分选人骨髓间充质干细胞的方法，其特征在于，所述方法通过以下步骤实现：(1)从骨髓悬液中分离得到单个核细胞，(2)用保藏号为CCTCC No.C200514的杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体ZUF10为标记，通过间接免疫磁珠分选系统正向分选获得ZUF10抗原阳性的人骨髓间充质干细胞；(3)将(2)步所得的ZUF10抗原阳性的人骨髓间充质干细胞在体外培养体系中贴壁生长、呈梭形，培养5天左右细胞开始明显扩增，扩增传代后细胞表型检测显示：CD29、CD44、CD166、CD105阳性，CD14、CD34、CD45、HLA-DR表达均为阴性，是均一的人骨髓间充质干细胞。