发明名称 | Y染色体复合扩增银染试剂盒 | ||
摘要 | 一种Y染色体复合扩增银染试剂盒,其特征是由分离包装的短引物YPA、短引物YPB、缓冲液(无MgCl<SUB>2</SUB>)、DNA聚合酶、MgCl<SUB>2</SUB>、A基因座长引物YPA-A-P1和A基因座长引物YPB-A-P2、B基因座长引物YPA-B-P1和B基因座长引物YPB-B-P2、C基因座长引物YPA-C-P1和C基因座长引物YPB-C-P2、D基因座长引物YPA-D-P1和D基因座长引物YPB-D-P2以及人工等位基因分型标准物构成。本发明对试剂盒内的引物进行了设计,从而能够高效率地同时对Y染色体上的任意四个STR基因座进行复合扩增,并可以方便地采用硝酸银染色方式检测扩增结果,对实验设备的成本要求不高,符合当前大多数分子生物学实验室的需要,具有特色。 | ||
申请公布号 | CN1172006C | 申请公布日期 | 2004.10.20 |
申请号 | CN03117426.4 | 申请日期 | 2003.03.10 |
申请人 | 四川大学 | 发明人 | 侯一平;李英碧;应斌武;冀强;董建国;吴谨;张霁 |
分类号 | C12Q1/68 | 主分类号 | C12Q1/68 |
代理机构 | 成都博通专利事务所 | 代理人 | 谢焕武 |
主权项 | 1、一种Y染色体复合扩增银染试剂盒,其特征是由分离包装的短引物YPA、短引物YPB、无Mgcl2的缓冲液、DNA聚合酶、Mgcl2、A基因座长引物YPA-A-P1和A基因座长引物YPB-A-P2、B基因座长引物YPA-B-P1和B基因座长引物YPB-B-P2、C基因座长引物YPA-C-P1和C基因座长引物YPB-C-P2、D基因座长引物YPA-D-P1和D基因座长引物YPB-D-P2以及人工等位基因分型标准物构成,其中:短引物YPA、YPB为非人类的基因组序列: YPA:5/--ATTTAGGTGACACTATAGAATAC-3/; YPB:5/--TAATACGACTCACTATAGGGAGAC-3/;A基因座长引物YPA-A-P1和A基因座长引物YPB-A-P2为分别在能够与人类的A基因座的基因组序列特异性结合的寡核苷酸引物P1、P2的5′端加上所述短引物YPA、YPB而得到的基因组序列;B基因座长引物YPA-B-P1和B基因座长引物YPB-B-P2为分别在能够与人类的B基因座的基因组序列特异性结合的寡核苷酸引物P1、P2的5′端加上所述短引物YPA、YPB而得到的基因组序列;C基因座长引物YPA-C-P1和C基因座长引物YPB-C-P2为分别在能够与人类的C基因座的基因组序列特异性结合的寡核苷酸引物P1、P2的5′端加上所述短引物YPA、YPB而得到的基因组序列;D基因座长引物YPA-D-P1和D基因座长引物YPB-D-P2为分别在能够与人类的D基因座的基因组序列特异性结合的寡核苷酸引物P1、P2的5′端加上所述短引物YPA、YPB而得到的基因组序列;人工等位基因分型标准物共包括了A基因座分型标准物、B基因座分型标准物、C基因座分型标准物和D基因座分型标准物:A基因座分型标准物为A基因座的长引物YPA-A-P1、YPB-A-P2经聚合酶链式反应所得产物,且长引物YPA-A-P1、YPB-A-P2经PCR扩增所得产物各占其总重量的二分之一;B基因座分型标准物为B基因座的长引物YPA-B-P1、YPB-B-P2经聚合酶链式反应所得产物,且长引物YPA-B-P1、YPB-B-P2经PCR扩增所得产物各占其总重量的二分之一;C基因座分型标准物为C基因座的长引物YPA-C-P1、YPB-C-P2经聚合酶链式反应所得产物,且长引物YPA-C-P1、YPB-C-P2经PCR扩增所得产物各占其总重量的二分之一;D基因座分型标准物为D基因座的长引物YPA-D-P1、YPB-D-P2经聚合酶链式反应所得产物,且长引物YPA-D-P1、YPB-D-P2经PCR扩增所得产物各占其总重量的二分之一;各组份的用量比为:浓度为400nM的短引物YPA0.25~0.35ml、浓度为400nM的短引物YPB0.25~0.35ml、无Mgcl2的缓冲液3.5~4.0ml、浓度为3u/μl的DNA聚合酶3000u、浓度为2.25mM的Mgcl22.5~3.5ml、浓度为40nM的A基因座长引物YPA-A-P1和A基因座长引物YPB-A-P2各0.25~0.35ml、浓度为40nM的B基因座长引物YPA-B-P1和B基因座长引物YPB-B-P2各0.25~0.35ml、浓度为40nM的C基因座长引物YPA-C-P1和C基因座长引物YPB-C-P2各0.25~0.35ml、浓度为40nM的D基因座长引物YPA-D-P1和D基因座长引物YPB-D-P2各0.25~0.35ml、浓度为40nM的人工等位基因分型标准物4ml,在人工等位基因分型标准物中,浓度为40nM的A基因座分型标准物1ml、浓度为40nM的B基因座分型标准物1ml、浓度为40nM的C基因座分型标准物1ml、浓度为40nM的D基因座分型标准物1ml。 | ||
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