监测和调节基因沉默的方法和工具

摘要

提供了使用双链RNA监测和调节真核生物中基因表达降低的方法和工具，该双链RNA除了包含与目标基因同源的核苷酸序列的dsRNA区域外，还包含设计下降的另外dsRNA区域。

主权项

1.一种监测真核生物细胞中目标基因表达降低的方法，所述方法包括步骤a)给真核细胞提供包含第一区域、第二区域、第三区域和第四区域的dsRNAi)所述第一区域包含与来自所述目标基因有义核苷酸区域的19个连续核苷酸具有至少94％序列同一性的至少19个连续核苷酸的核苷酸序列；ii)所述第二区域包含与来自所述目标基因的所述有义核苷酸区域的19个连续核苷酸的互补核苷酸序列具有至少94％序列同一性的至少19个连续核苷酸的核苷酸序列；iii)所述第一区域和所述第二区域能够形成双链RNA区域；iv)所述第三区域包含与所述真核细胞中存在的不同于所述目标基因的第二个基因的有义核苷酸区域的19个连续核苷酸具有至少94％序列同一性的至少19个连续核苷酸的核苷酸序列；v)所述第四区域包含与来自所述第二个基因的所述有义核苷酸区域的所述19个连续核苷酸的互补序列具有至少94％序列同一性的至少19个连续核苷酸的核苷酸序列；vi)所述第三区域和所述第四区域能够形成双链RNA区域；和b)通过分析所述第二个基因表达的降低，监测所述目标基因表达的降低。