一种H5N1型禽流感病毒荧光扩增检测试剂盒及检测方法

摘要

本发明提供了一种H5N1型禽流感病毒荧光扩增检测试剂盒及及其利用试剂盒检测禽流感病毒的检测方法，试剂盒包括H5N1型禽流感病毒血凝素基因标准品、荧光扩增检测试剂以及DNA聚合酶与逆转录酶，荧光扩增检测试剂主要包括一步法RT－PCR缓冲液、特异性扩增引物及特异性探针、脱氧三磷酸核苷混合物，所述H5N1型禽流感病毒血凝素基因标准品部分序列为5’－TGGATGGCTCCTCGGAAACCCAATGTGTGACGAATTCATCAATGTGCCGGAATGGTCTT－3’，本发明方法可直接检测病原体核酸，在禽流感发病早期症状不典型时期，就可以检测出是否含有H5N1型禽流感病毒特异性基因，为及早隔离、确诊和治疗提供方便。

主权项

1.一种H5N1型禽流感病毒荧光扩增检测试剂盒，包括H5N1型禽流感病毒血凝素基因标准品、荧光扩增检测试剂以及DNA聚合酶与逆转录酶，所述荧光扩增检测试剂主要包括一步法RT-PCR缓冲液、特异性扩增引物及特异性探针、脱氧三磷酸核苷混合物，其特征在于：所述H5N1型禽流感病毒血凝素基因标准品部分序列为5’-TGGATGGCTCCTCGGAAACCCAATGTGTGACGAATTCATCAATGTGCCGGAATGGTCTT-3’，所述特异性扩增引物为：上游引物序列5’-TGGATGGCTCCTCGGRAAC-3’，下游引物序列5’-ARGACCATTCCGGCACATT-3’，所述特异性探针序列为5’-FAM-TGTGTGACGAATTCAT-NFQ-MGB-3’，其中FAM为报告荧光基团，NFQ为非荧光淬灭基团，MGB为修饰基团。