用于牛、羊X/Y精子快速分离的UTY抗体纳米颗粒的制备方法及应用

摘要

本发明公开了一种用于牛、羊X/Y精子快速分离的UTY抗体纳米颗粒的制备方法及应用：利用Y精子UTY抗原重组蛋白制备抗Y精子UTY抗原的单克隆抗体；将所述单克隆抗体用胃蛋白酶进行酶切，并分离得到抗UTY抗原的Fab’片段；制备包含Fab’片段的磷酸钙纳米颗粒。本发明制备得到的UTY抗体纳米颗粒，具有在Y精子表面和进入其内部进行抗原抗体反应的能力，从而导致Y精子凝集，对X、Y精子的分离效率达到80～95％，具有X、Y精子分离简单、快速、廉价及效率高等特点，且损害极小。

主权项

一种用于牛、羊X/Y精子快速分离的UTY抗体纳米颗粒的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：1)构建Y精子H‑Y抗原原核表达系统，所述原核表达系统表达的目的基因为UTY基因的编码序列；2)利用步骤1)构建的Y精子H‑Y抗原原核表达系统制备Y精子UTY抗原重组蛋白；3)利用Y精子UTY抗原重组蛋白制备抗Y精子UTY抗原的单克隆抗体；4)将所述单克隆抗体用胃蛋白酶进行酶切，将酶切得到的UTY抗体的抗原结合片段Fab’进行分离；5)制备包含Fab’片段的磷酸钙纳米颗粒。