发明名称 小干扰RNA快速筛选的载体及其构建方法和应用
摘要 一种小干扰RNA快速筛选的载体,小干扰RNA快速筛选载体具有一个3.0kb的骨架载体并含有一个多克隆位点,在载体5’端的多克隆位点处存在报告基因及用于插入一个筛选靶基因表达元件的多克隆位点,其下游存在两个相反方向的任意两个不同的pIII启动子,两个启动子之间有两个酶切位点,并在两个酶切位点之间插入一个用于蓝白斑筛选的表达元件,在载体的3’端多克隆位点处插入一个内参报告基因。构建方法包括:构建小干扰RNA载体的基本骨架、构建报告基因-Flag表达元件的载体、构建小干扰RNA表达载体、构建小干扰RNA快速筛选的载体步骤。小干扰RNA快速筛选的载体在筛选小干扰RNA中的用途。
申请公布号 CN101633930A 申请公布日期 2010.01.27
申请号 CN200910022909.6 申请日期 2009.06.11
申请人 陕西师范大学 发明人 夏海滨;边晔;王东阳;孙晓聪;冯真真;李婧;郑晓晶
分类号 C12N15/65(2006.01)I;C12N15/53(2006.01)I;C12N15/66(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;G01N21/76(2006.01)I 主分类号 C12N15/65(2006.01)I
代理机构 西安永生专利代理有限责任公司 代理人 申忠才
主权项 1、一种小干扰RNA快速筛选的载体,其特征在于:小干扰RNA快速筛选载体具有一个3.0kb的骨架载体并含有一个多克隆位点,在载体5’端的多克隆位点处存在报告基因及用于插入一个筛选靶基因表达元件的多克隆位点,其下游存在两个相反方向的任意两个不同的pIII启动子,两个启动子之间有两个酶切位点,并在两个酶切位点之间插入一个用于蓝白斑筛选的表达元件,在载体的3’端多克隆位点处插入一个内参报告基因。
地址 710062陕西省西安市长安南路199号
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