乳及乳制品中游离态与结合态羧甲基赖氨酸的检测方法

摘要

本发明为一种乳及乳制品中游离态与结合态羧甲基赖氨酸的检测方法，同位素稀释高效液相色谱串联离子阱质谱法，检测乳及乳制品中游离态与蛋白结合态羧甲基赖氨酸。本发明避免了离子对试剂的使用而不需要任何衍生化前处理步骤，且有高效、精确、灵敏度高、重现性好、线性范围宽的特点，在分析乳及乳制品中游离态和蛋白结合态羧甲基赖氨酸含量方面有其独到之处，能够快速、准确的对乳及乳制品中游离态与结合态羧甲基赖氨酸进行定性、定量分析，可非常好的应用于乳及乳制品中游离态与结合态羧甲基赖氨酸的检测。

主权项

一种乳及乳制品中游离态与结合态羧甲基赖氨酸的检测方法，其特征在于按如下检测条件进行：HPLC条件为色谱柱为Waters Symmetry C18、150mm×4.5mm、5μm；柱温为25℃；进样量为10μL；流动相选择质量百分数为0.3％甲酸水溶液和甲醇；流动相流速为200μL/min；运行时间：12min；采用梯度洗脱方式进行检测，梯度洗脱方式的步骤为：0～7分钟：0.3％甲酸水溶液5％，甲醇95％，7～8分钟：0.3％甲酸水溶液22％，甲醇78％，8～12分钟：0.3％甲酸水溶液5％，甲醇95％；质谱条件为色谱柱流出组分进入质谱仪的流速为200μL/min，离子源为电喷雾ESI+模式；鞘气流速为40arb；辅助气流速为10arb；电喷雾电压为4.5kv；毛细管温度为275℃；毛细管电压为16V；透镜电压为45V；载气为氮气；碰撞气为氦气；采用一级质谱全扫描模式检测模式，50～500m/z；二级质谱为选择性检测SRM模式，羧甲基赖氨酸准离子峰为205m/z；特征碎片离子峰为130m/z和80m/z；分离宽度为1.5m/z；碰撞能量25％。