一种猕猴桃茎叶、花蕾、美味根黄酮类HPLC指纹图谱建立方法

摘要

本发明公开了一种猕猴桃茎黄酮类HPLC指纹图谱建立及其指纹图谱，指纹图谱建立包括：供试品溶液的制备，对照品溶液的制备；以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.2％磷酸水溶液为流动相B，进行梯度洗脱；检测波长为254nm；分别精密吸取对照品溶液10μl与供试品溶液10μl，柱温为35℃，注入液相色谱仪，测定。本发明将猕猴桃枝条、叶、花药材作为一个整体对待，通过比较其共有峰可以找出不同药材之间的细微差异；供试品制作简便，色谱条件容易实现；稳定性和重现性都比较好；适于对猕猴桃枝条、叶、花药材真伪、产地和品质的鉴别和控制。

主权项

一种猕猴桃茎叶、花蕾、美味根黄酮类HPLC指纹图谱建立方法，其特征在于，所述的猕猴桃茎叶、花蕾、美味根黄酮类HPLC指纹图谱建立方法采用高效液相色谱法，具体的步骤如下：步骤一，供试品溶液的制备，采用粉碎的阴干猕猴桃茎叶、花蕾、美味根，加入甲醇，过滤和清洗，取续滤液作为供试品溶液；步骤二，对照品溶液的制备，称取芦丁对照品和槲皮苷对照品，加50％甲醇制成每1ml各含0.12mg的混合溶液，摇匀，即得；步骤三，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.2％磷酸水溶液为流动相B，进行梯度洗脱；检测波长为254nm；步骤四，分别精密吸取对照品溶液10μl与供试品溶液10μl，柱温为35℃，注入液相色谱仪，测定，即得，以芦丁和槲皮苷分别计算出总黄酮含量，最终结果以平均值计；所述供试品溶液的制备具体包括：将阴干猕猴桃茎叶、花蕾、美味根，粉碎为40目，分别称取药材粉各4.0克,加40ml甲醇，称定重量，加热回流提取60min,放冷，用甲醇补齐重量，过滤，将容器和滤渣用甲醇分别清洗若干次，将滤液和清洗液合并，用旋转蒸发仪蒸干，再用3ml甲醇溶解并清洗容器，合并后过0.45um孔径微孔滤膜，取续滤液作为供试品溶液；所述梯度洗脱以如下体积浓度配置进行：0分钟时，流动相A为5％，流动相B为95％；15分钟时，流动相A为10％，流动相B为90％；40分钟时，流动相A为20％，流动相B为80％；45分钟时，流动相A为90％，流动相B为10％；55分钟时，流动相A为90％，流动相B为10％；56分钟时，流动相A为5％，流动相B为95％；68分钟时，流动相A为5％，流动相B为95％。